Реакция на фиксиране на комплемента (CBC)

Реакцията на фиксиране на комплемента (PCR) се провежда в две фази: в първата фаза антигенът се комбинира с тестовия серум, в който се приемат антитела и се добавя комплемент, инкубира се в термостат за 30 минути.

Втора фаза: добавете хемолитичната система (овчи еритроцити + хемолитичен серум). След инкубация в термостат за 30 минути, вземете предвид резултата.

При положителен CSC, серумните антитела, когато се комбинират с антигена, образуват имунен комплекс, който прикрепя комплемента към себе си и хемолизата няма да настъпи. Ако реакцията е отрицателна (в тествания серум няма антитела), комплементът ще остане свободен и ще настъпи хемолиза.

RSC се използва за серологична диагностика на сифилис, гонорея, тиф и други заболявания.

Реакциите на имунитет, използващи маркирани антигени и антитела, се основават на факта, че една от съставките, участващи в реакцията (антигени или антитела), се комбинира с етикет, който може лесно да бъде открит. Като етикет се използват флуорохроми (RIF), ензими (ELISA), радиоизотопи (RIA), електронно-плътни съединения (IEM)..

Ензимно-свързаният имуносорбентен анализ (ELISA), подобно на други имунни реакции, се използва: 1) за определяне на неизвестен антиген с помощта на известни антитела или 2) за откриване на антитела в кръвен серум с помощта на известен антиген. Особеността на реакцията е, че известна съставка на реакцията се комбинира с ензим (например, пероксидаза). Наличието на ензима се определя с помощта на субстрат, който е оцветен от действието на ензима. Най-широко използваният ELISA в твърда фаза.

1) Откриване на антиген. Първият етап е адсорбцията на специфични антитела върху твърдата фаза, които са полистиролови или поливинилхлоридни повърхности на ямките от пластмасови панели. Вторият етап е добавянето на тестовия материал, в който се предполага наличието на антиген. Антигенът се свързва с антитела. След това кладенците се измиват. Третият етап е добавянето на специфичен серум, съдържащ антитела срещу този антиген, маркирани с ензим. Обозначените антитела се свързват с антигени и излишните антитела се отстраняват чрез измиване. По този начин, ако в тествания материал има антигени, на повърхността на твърдата фаза се образува антитяло-антиген-антитела, белязани с ензимен комплекс. Добавя се субстрат за откриване на ензима. За пероксидазата субстратът е ортофенилендиамин, смесен с Н2ОТНОСНО2 в буферен разтвор. Ензимът произвежда продукти, които имат кафяв цвят.

2) Откриване на антитела. Първият етап е адсорбцията на специфични антигени по стените на кладенците. Обикновено в търговските тестови системи антигените вече се адсорбират на повърхността на ямките. Вторият етап е добавянето на тестовия серум. В присъствието на антитела се образува комплекс антиген-антитяло. Третият етап - след измиване към гнездата се добавят антиглобулинови антитела (антитела срещу човешки глобулини), маркирани с ензим. Резултатите от реакцията се оценяват както по-горе..

Като контролни проби се използват проби, за които се знае, че са положителни и за които се знае, че са отрицателни..

ELISA се използва за диагностициране на много инфекциозни заболявания, по-специално HIV инфекция, вирусен хепатит.

Имуноблотингът е вид ELISA (комбинация от електрофореза и ELISA). Методът на гел електрофореза разделя биополимери, например, антигени на вируса на човешката имунна недостатъчност. След това отделените молекули се прехвърлят на нитроцелулозната повърхност в същия ред, в който са били в гела. Процесът на прехвърляне се нарича петно, а полученият печат се нарича петно ​​(петно). Този отпечатък се влияе от тестовия серум. След това добавете серум срещу човешки глобулини, белязан с пероксидаза, след това субстрата, който под действието на ензима става кафяв. Кафяви ивици се образуват там, където антителата се свързват с антигените. Методът ви позволява да откривате антитела към отделни антигени на вируса.

Радиоимуноанализ (RIA). Методът ви позволява да определите количеството антиген в тестовата проба. Първо, материал, за който се подозира, че съдържа антиген, е прикрепен към имунния серум, след това известен антиген, белязан с радиоизотоп, например I 125. В резултат на това откриваем (немаркиран) и познат белязан антиген се свързва с ограничен брой антитела. Тъй като белязаният антиген се добавя в определена доза, е възможно да се определи колко от него се свързва с антителата и каква част остава свободна поради конкуренцията с немаркирания антиген и е отстранена. Количеството белязан антиген, свързан с антителата, се определя с помощта на брояч. Той е обратно пропорционален на количеството открит антиген.

Имуноелектронна микроскопия (IEM). Специфичен антисерум, маркиран с електронно плътно вещество, е прикрепен към антиген, например грипен вирус. Като етикет се използват метални протеини (феритин, хемоцианин) или колоидно злато. Под микроскопия в електронен микроскоп се правят снимки, на които се виждат грипни вириони с прикрепени тъмни точки - молекули на белязани антитела.

тестови въпроси

Придобит имунитет, неговата разлика от наследствения (специфичен, вроден). Видове придобит имунитет.

Задача. В семейството детето Валери, тригодишно, се разболя от дифтерия. Други членове на семейството не се разболяват, а майката е имала дифтерия в детството и бащата е бил ваксиниран с дифтериен токсоид. По-голямата сестра Наташа, на пет години, не е била ваксинирана едновременно с дифтериен токсоид поради медицински противопоказания, така че е трябвало да се подложи на спешна профилактика с помощта на антидифтериен антитоксичен серум. По-малкият брат Виталий на три месеца не се разболя, въпреки че не беше ваксиниран с нищо. В къщата има котка и куче, те не са болни. Име за всеки от членовете на семейството и за животните вида на имунитета, поради който не са се разболели.

Какво е антиген? Какви вещества могат да бъдат антигени? Пълни антигени и хаптени, как те се различават един от друг? Структура на антигена. Какво е името на частта от антигенната молекула, която определя нейната специфичност? Назовете известни на вас антигени. Какво представляват автоантигените? Антигенна структура на микробна клетка. Флагелатни и соматични антигени; локализация, обозначение на буквите, химическа природа, връзка с температурата, производствен метод, практическо приложение. Toxoid, неговите свойства, приложение, производство. Каква тъкан изгражда имунната система на организма? Посочете централните и периферните органи на имунната система на човека. Опишете формирането на хуморален и клетъчен имунен отговор. Посочете клетките, които улавят и усвояват антигена; клетки, които взаимодействат при формирането на хуморален имунитет, клетъчен имунитет; клетки, които се трансформират и превръщат в плазмени клетки, които произвеждат антитела; клетки, които стимулират този процес; клетки, които потискат имунния отговор; клетки, които убиват туморни клетки и клетки, заразени с вирус. Какво представляват антителата? Как се получава имунен серум? Как се получава серум, който неутрализира тетаничния токсин? Срещу какви антигени се образуват антитоксини, аглутинини, хемолизини? Какви антитела се образуват, когато дифтерийният токсоид се въведе в тялото? дифтерийни бактерии? Химичната природа и структура на антителата. Какво представлява активният сайт на имуноглобулин? Избройте класовете имуноглобулини, техните свойства. Посочете класа имуноглобулини, които могат да преминат през плацентата. От какъв клас са секреторните имуноглобулини? Динамика на натрупване на антитела. По какво вторичният имунен отговор се различава от първичния? Как се използват знанията за динамиката на имунния отговор в практическата медицина? Какво представляват реакциите на имунитета, какъв е механизмът им, фази на реакция. В кои 2 посоки се използват имунните реакции? Избройте реакциите на имунитета.

Задача. Заменете липсващите думи "токсоид" или "антитоксин": _________ е антиген, _________ е антитяло, __________ създава активен имунитет при въвеждане в тялото, __________ създава пасивен имунитет при въвеждане в тялото, __________ се получава чрез имунизиране на животни, ___________ се получава от токсин при излагане формалин и топлина, ___________ неутрализира токсините, __________ предизвиква образуването на антитела в организма.

Реакция на аглутинация: какво е аглутинация, какво е антиген, какво е антитяло; методи за настройка, какви контроли са зададени и защо; как трябва да изглеждат контролите. Аглутиниращи серуми, какво съдържат, как се получават, за какво се използват; какво представлява серумният аглутиниращ титър? Непряка (пасивна) реакция на хемаглутинация: какво служи като антиген в тази реакция, как се получава, механизмът на реакцията. Какво е диагностичен еритроцит? Какво е диагностичен еритроцитен антитяло? Реакции на валежи: какво е валежи, какво е антиген; как да взема утаяващ серум? Какво представлява утаяващият серумен титър? Методи за настройка, практическо приложение.

Реакция на фиксиране на комплемента (CBC): CBC принцип; какво се образува, когато имунният серум взаимодейства със специфичен антиген; какво се случва с комплемента, ако той присъства по време на това взаимодействие? Каква е съдбата на комплемента, ако няма специфичен афинитет между антигена и антителата? Ако крайният резултат от CSC е хемолиза, какво означава това - положителен или отрицателен? Методология за създаване на RSK. Защо тестовият серум трябва да бъде инактивиран? Хемолитичен серум: какво съдържа, как се получава, какъв е титърът и как се определя? Допълнение: химическа природа, връзка с топлината, къде се съдържа? Как може да се унищожи комплемента? Което на практика се използва като допълнение?

Задача. На дрехите на мъжа, обвинен в убийството, е открито петно ​​от кръв. Каква реакция може да се използва, за да се определи дали това е човешка кръв; какъв ще бъде антигенът в тази реакция и какви ще са антителата; какъв диагностичен продукт трябва да бъде на разположение в лабораторията за тази реакция, как се приготвя?

Задача. Как да използваме реакция на валежи, за да определим дали проба от говеждо или конско месо, доставена за анализ; какви диагностични лекарства са необходими?

Реакция на утаяване с агарен гел, методи за втвърдяване, практическо приложение.

Серологични изследвания: какво е това, диагностични методи, процес на доставка, интерпретация на резултатите

Всеки от нас през живота си поне веднъж се е сблъсквал с инфекциозни заболявания. Всички те са причинени от голям брой патогенни агенти: бактерии, вируси, протозои и гъби. Микробиологията има милиони микроорганизми, които могат да доведат до развитие на инфекция при хората.

Някои от тях са опортюнистични патогени, други са задължителни патогени. В медицината има огромен брой лабораторни методи за идентифициране на патогена. Всеки от тях има свои собствени недостатъци и предимства. Чувствителността и точността на метода е от голямо значение..

Най-често използваните методи са генетични молекулярни и серологични изследвания. Когато получават направление за молекулярни и серологични изследвания, пациентите се замислят какво е това и вярват, че това е много труден преглед. Всъщност процесът на предаване на анализа не надвишава 5 минути, а съдържанието на информация варира от 95-100%.

  1. Какво е серологичен анализ
  2. Предимства и недостатъци
  3. В какви случаи се предписва
  4. Диагностични методи
  5. Имунофлуоресцентна реакция RIF
  6. Непряка реакция на хемаглутинация на RNGA
  7. ELISA ензимен имуноанализ
  8. Как да се подготвим за доставка
  9. Процес на анализ
  10. Декодиране на резултатите
  11. Какво да правим, ако бъде открита полово предавана болест

Какво е серологичен анализ

Серологичните тестове са важен инструмент за идентифициране на причината за инфекциозно заболяване. Серодиагностиката е специфичен кръвен тест, който се основава на взаимодействието на антигени и антитела в серума.

Антителата са протеинови молекули, които се образуват в човешкото тяло няколко дни след излагане на патоген. Те са строго специфични за всяка инфекция и са разработени за унищожаване на патогена. Разпознаването на тези протеинови фракции дава възможност за бързо идентифициране на микроорганизма, до който са били образувани. Антигените, от друга страна, са чужди протеини, открити в бактериите. Синтезираното антитяло намира антиген в кръвта и здраво се свързва с него, предотвратявайки неблагоприятното му въздействие върху тялото.

Реакцията на свързване на тези два протеина за образуване на един комплекс лежи в основата на използването на всички серологични реакции. За търсене на антитела се използват специални стандартни разтвори с патогенни антигени (диагностикуми), които се добавят към анализираната кръв. Серодиагностиката определя всички протеинови маркери на инфекциите, а последващото декодиране на резултатите също така предоставя информация за продължителността на заболяването. Тази характеристика е характерна само за серологичен анализ, което го прави метод на избор в много клинични ситуации..

Предимства и недостатъци

Серологичният метод на лабораторна диагностика има голям брой предимства, което дълбоко го въведе в практическата употреба във всички отрасли на медицината: гинекология, урология, инфекциозни болести и венерология.

Серодиагностиката е публично достъпен тест, който осигурява бързи и точни резултати. Не изисква продължителна подготовка за събиране на материали и се понася лесно от всички пациенти. За да се вземе венозна кръв от пациент, е необходимо да се спазва диета само за 48 часа. Серологичните тестове също имат висока специфичност (100%), чувствителност (95%) и точност (90-95%).

Но този анализ на венозна кръв изисква много скъпа диагностика, което също влияе на нейната цена. Някои патогени са слабо имуногенни, т.е. тялото произвежда малко антитела към тях, така че серодиагностиката е невъзможна. В допълнение, методът се използва много по-рядко за вирусни инфекциозни патологии, като е по-нисък по ефективност от PCR анализа..

В какви случаи се предписва

За диагностициране на инфекциозни заболявания: бактериални, вирусни, протозойни, паразитни и смесени инфекции се предписват серологични лабораторни кръвни изследвания. Откриването на антитела е най-широко използвано в акушерско-гинекологичната и урологичната практика. В урологията това лабораторно изследване се използва за уретрит с неясна етиология, баланит и баланопостит. В гинекологията те се изпращат за изследване за всеки възпалителен процес на репродуктивната система (вулвовагинит, колпит, цервицит и ендометрит).

В акушерството на всяка бременна жена се предписва тест за венозна кръв, за да се изключат заболявания, опасни за плода. Тези инфекции се наричат ​​"TORCH-комплекс" и се определят с помощта на серологични тестове. TORCH инфекциите причиняват малформации в развиващия се плод, които често са несъвместими с живота. Ето защо ранната и точна диагностика на тези инфекции е основната цел на акушер-гинеколога. Серологията се извършва, дори ако има съмнение за мъжко или женско безплодие поради инфекциозна патология.

Ако лекарят подозира, че пациентът има инфекция, предавана по полов път, тогава е необходимо цялостно изследване, включително серодиагностика. Ако се установи, че един от партньорите има заболяване от групата с ППИ, тогава вторият партньор трябва да бъде тестван, дори ако той няма клинични симптоми.

Диагностични методи

Серологичните тестове включват няколко вида. Всички те се основават на търсенето на антитела (имуноглобулини) и антигени, но те се извършват по различни начини и имат различни диагностични критерии за поставяне на диагноза. Серологичните методи на лабораторни изследвания, в зависимост от методологията, се разделят на прости и сложни. Класификацията се основава на това колко протеини трябва да бъдат намерени: простите реакции се определят само от антитела или антигени, а сложните - комплекси "антиген + имуноглобулин". Сложният метод за изследване е по-предпочитан, тъй като чувствителността на анализа е много по-висока.

Най-често в лабораториите серологичната диагностика е представена от следните имунохимични серореакции:

  • реакция на имунофлуоресценция (RIF);
  • ензимен имуноанализ (ELISA);
  • реакция на непряка хемаглутинация (RNGA);
  • реакция на фиксиране на комплемента (CBC).

Този тип изследвания се отнасят до сложни серореакции и имат значителни предимства пред останалите. Те се извършват изключително бързо, имат висока точност при диагностициране на заболявания и не изискват продължителна подготовка: от пациента се изисква само да премине тест за венозна кръв.

Имунофлуоресцентна реакция RIF

Реакцията на имунофлуоресценция (RIF) или анализ на Кунс е метод за бързо откриване на антигени на патогенен агент в биоматериала на пациента. За RIF се използва специално багрило - флуорохром, който може да свети под луминесцентен микробиологичен микроскоп. Флуорохром се добавя към диагностичния серум със стриктно спазване на концентрацията, в противен случай реакцията може да покаже фалшиви резултати. Имунофлуоресцентната реакция е два вида: директна и индиректна.

Директната реакция на Кунс разкрива само антигените на патогена. За да се определят, към биоматериала се добавя диагностичен серум, състоящ се от антитела и флуорохром. Антигените върху клетъчната стена на патогена се свързват с оцветените антитела. Доктор по лабораторна реакция изследва стъклен предмет под микроскоп и вижда ярко зелено сияние. Типичен пример за такава реакция е идентифицирането на хламидия в контраст със синьото на Evans.

Индиректният RIF (RNIF) определя комплекси антиген-антитела. За целта лекарят последователно добавя немаркирани имуноглобулини към пробата, така че те да се свързват с антигени. След това към образуваните имунни комплекси се добавя нов серум, съдържащ антитела, вече маркирани с багрило към новообразуваните комплекси. Най-честата директна реакция се използва за диагностициране на вирусни заболявания..

Единственият недостатък на тези реакции е определена степен на субективност, когато се вземат предвид резултатите: една и съща интензивност на светлината понякога се разглежда от лекарите по различен начин, което в крайна сметка води до фалшиви данни от лабораторни тестове..

Непряка реакция на хемаглутинация на RNGA

RNGA е анализ, насочен към откриване на имуноглобулини или антигени в различни биологични течности. Непряката реакция на хемаглутинация е един от най-точните методи за определяне на титъра на имуноглобулините, което дава възможност да се прецени стадият на инфекциозния процес. Увеличаването на титъра на имуноглобулините с 4 пъти при два кръвни теста, взети с интервал от няколко седмици, показва остър инфекциозен процес с бактериална или вирусна етиология. RNGA дава възможност на лекуващия лекар да предпише правилната лекарствена терапия, като се вземе предвид стадият на заболяването. Проучването е широко използвано за откриване на ППИ, менингококова инфекция, ботулинов токсин (ботулинов токсин) и повечето вирусни инфекции.

За изследването се използват червени кръвни клетки - еритроцити, на повърхността на които са разположени антигени или антитела. Серумът се нарича антигенен или антитела еритроцитен диагностик. Към изследваната кръв се добавя Diagnosticum, след което се следи реакцията. Когато тези еритроцити се прикрепят към антигени или кръвни имуноглобулини, се образуват комплекси и червените кръвни клетки започват да се утаяват. При отрицателен тест червените кръвни клетки се натрупват като малко петно ​​с форма на бутон. Ако на дъното на епруветката или таблетката се е образувала утайка с фестонни ръбове под формата на чадър, тогава реакцията се счита за положителна.

Трудността при провеждането на този серологичен тест се крие в необходимостта от точна подготовка на еритроцитния диагностик и стриктно спазване на концентрациите на използваните компоненти.

ELISA ензимен имуноанализ

Методът на ензимен имуноанализ се счита за най-точната, специфична и чувствителна серореакция. Отчитането на резултатите от ELISA е автоматизирано, а оценката на човешкия фактор и субективните данни са изключени. Точността на резултата достига 98%, а при повторно изследване - 100%. ELISA се използва за диагностика на инфекции, предавани по полов път, ХИВ, вирусен хепатит А, В, С, D, Е, TORCH инфекции и много други заболявания.

Има повече от десет модификации на този анализ (директни, индиректни, неконкурентни, твърдофазни и др.), Но всички те имат специални, характерни диагностични характеристики, но сходен принцип на поведение. Фазите на серологичните реакции на имуноанализ включват създаването на комплекс антиген-антитяло, към който се добавят ензими, които играят ролята на етикет. След това тестовият материал се поставя върху специална плоча, поставя се в автоматизирана система и започва търсенето на комплекси, маркирани с радионуклиди. Анализаторът открива светещи следи, измерва оптичната плътност и степента на луминисценция на имунните клетки и след това дава резултата от анализа.

Как да се подготвим за доставка

Анализът не изисква специална подготовка, всички правила съответстват на обичайното даряване на венозна кръв.

От пациента се изисква стриктно да спазва редица прости правила:

  • 72 часа преди манипулацията трябва да спазвате диета: не можете да ядете мазни, пържени, солени и пикантни храни, алкохолните напитки също са забранени;
  • препоръчително е да поддържате оптимален воден баланс в организма и за това трябва да изпиете поне два литра чиста питейна вода;
  • анализът на венозна кръв се извършва на празен стомах, следователно поне 10 часа преди манипулацията не можете да ядете, да пиете чай, кафе и други напитки;
  • Не пушете 4 часа преди процедурата.

Ако по здравословни причини пациентът е длъжен да пие някакви хапчета, е необходимо предварително да уведоми лекуващия лекар за това. Един час преди доставката на материала се препоръчва да се избягват физически натоварвания и преди да влезете в процедурната стая, трябва да седнете и да си починете 10-15 минути.

Процес на анализ

Вземането на венозна кръв за серологично изследване се извършва сутрин. Пациентът трябва да пристигне в лабораторията предварително, като вземе със себе си необходимите документи (паспорт и направление за анализ).

На пациента се предлага да отиде в процедурната стая и да седне удобно на стола. Кръв се взема от вена, разположена в огъването на лакътя, поради което е необходимо да се освободи областта на предмишницата и лакътя от нещата. На рамото се нанася турникет, а под мишницата се поставя възглавница. Сестрата слага стерилни ръкавици за еднократна употреба и обработва мястото на пункцията с памучен тампон, потопен в дезинфектант.

Алгоритъмът за провеждане на венозна инжекция включва изпомпване на кръв във вената, за това пациентът е помолен да стисне и отпусне юмрука си няколко пъти. В този случай съдът се визуализира по-добре и се палпира, което улеснява събирането на материал. След това медицинската сестра вкарва иглата на спринцовката във вената, изтегля 10 милилитра кръв и поставя бактерициден пластир на мястото на инжектиране. За да се избегне образуването на хематом, след манипулация ръката трябва да бъде сгъната в лакътя за 15-20 минути.

Декодиране на резултатите

За правилна диагноза серологичните реакции трябва да бъдат дешифрирани от квалифициран специалист. Откриването на антитела все още не показва наличието на болестта; в някои случаи циркулацията на имуноглобулини в кръвта е норма. И така, в нашето тяло постоянно присъстват IgM антитела срещу морбили, варицела и др. Те са маркер на предишната инфекция и ни предпазват от реинфекция. Следователно регистрацията на резултатите от кръвното изследване и декодирането на серологичното изследване трябва да се извършва индивидуално за всеки пациент..

Съществуват обаче някои серологични маркери за инфекциозни заболявания:

  • Откриването на имуноглобулини от клас А в кръвта към вирус или бактерия показва остър инфекциозен процес, който продължава не повече от 14 дни.
  • Ако в кръвта се открият имуноглобулини от клас М, тогава е необходима разширена лабораторна диагностика, тъй като тези антитела са маркер както за минало заболяване, така и за продължителна инфекция.
  • Увеличаването на титъра на антителата с 4 или повече пъти при два последователни кръвни теста показва наличието на инфекциозно заболяване.
  • Откриването на всякакви патогенни антигени показва, че патогенът присъства в тялото.

В случай на неясна диагностична картина се извършват повторни серологични изследвания или изследването се допълва с други методи за изследване (PCR, бактериална култура и др.)

Какво да правим, ако бъде открита полово предавана болест

Ако серологичната диагностика е потвърдила наличието на ППИ, е необходимо незабавно да се премине към етапа на лечение, за да се избегнат усложнения и хронифициране на процеса. Пациентът трябва да се регистрира отново за консултация с лекуващия лекар. Той ще предпише етиотропно комплексно лечение и ще наблюдава динамично състоянието на пациента по време на лекарствената терапия.

Заглавие: Серологични изследвания: какво е това, кръвен тест за определяне на инфекции, как да дарявам и дешифрирам, методи на реакции за определяне на заболявания

Описание: Какво представляват серологичните тестове и за идентифициране на какви заболявания се използват. Как е кръвният тест за определяне на инфекцията. Как да подготвим, предадем и дешифрираме резултата след получаване. Методи за провеждане на реакции за определяне на заболяването.

Кръвен тест за сифилис (RW)
(Реакция на Васерман)

Кръвни тестове

  • общо описание
  • Норми
  • Болести

общо описание

Реакцията на Wassermann (RW) е най-популярната имунологична реакция, използвана за диагностициране на сифилис от откриването му през 1906 г. RW принадлежи към групата на реакциите на свързване на комплемента (CSC) и се основава на способността на кръвния серум на пациент със сифилис да образува комплекс със съответните антигени. Съвременните CSC методи, използвани за диагностициране на сифилис, се различават значително по своите антигени от класическата реакция на Васерман, но терминът „реакция на Васерман“ традиционно се запазва от тях.

В кръвта на заразен човек се появяват антитела, произведени от имунната система. Причинителят на заболяването, treponema pallidum, съдържа кардиолипиновия антиген, който причинява производството на антитела, определени от RW. Положителната реакция на Васерман просто показва наличието на такива антитела в човешката кръв и на тази основа се прави заключение за наличието на заболяване.

Реакцията на хемолиза е показател за резултата от изследването в RAC. В реакцията участват два компонента: овчи еритроцити и хемолитичен серум. Хемолитичен серум се получава чрез имунизиране на заек с овчи еритроцити. Инактивира се в рамките на 30 минути при температура 56 ° C. Резултатите от RSC се оценяват в зависимост от наличието или отсъствието на хемолиза в епруветките. Наличието на хемолиза се обяснява с факта, че ако в тествания серум няма сифилитични антитела, тогава реакцията антиген-антитяло не настъпва и цялото допълнение отива към реакцията на овчи еритроцити-хемолизин. И ако има специфични антитела, комплементът напълно преминава към реакцията антиген-антитяло и хемолизата не настъпва.

Всички съставки за реакцията на Вассерман се приемат в същия обем - 0,5 или 0,25 ml. За да се фиксира здраво комплемента върху специфичен комплекс, смес от изследвания серум, антиген и комплемент се поставя в термостат при 37 ° за 45-60 минути. (I фаза на реакцията), след което се въвежда хемолитична система, състояща се от агнешки еритроцити и хемолитичен серум (II фаза на реакцията). След това епруветките отново се поставят в термостат за 30-60 минути преди началото на хемолизата в контролата, в която антигенът се замества с физиологичен разтвор и се добавя физиологичен разтвор вместо тестовия серум. Антигените за реакцията на Вассерман се освобождават готови с указание за титъра и метода на разреждане.

Максималната положителност на реакцията на Вассерман обикновено се обозначава с броя на кръстосванията: ++++ (рязко положителна реакция) - показва пълно забавяне на хемолизата; +++ (положителна реакция) - съответства на значително забавяне на хемолизата, ++ (слабо положителна реакция) - доказателство за частично забавяне на хемолизата, + (съмнителна реакция) - съответства на леко забавяне на хемолизата. Отрицателните RW се характеризират с пълна хемолиза във всички епруветки.

Понякога обаче са възможни и фалшиво положителни резултати - това се дължи на факта, че кардиолипинът се съдържа в известно количество в клетките на човешкото тяло. Човешката имунна система не създава антитела срещу „собствен“ кардиолипин, но има изключения от това правило, поради което се получава положителна реакция на Вассерман при напълно здрав човек. Това особено често се наблюдава след тежки вирусни и други заболявания - пневмония, малария, чернодробни и кръвни заболявания, по време на бременност, т.е. в моменти на сериозно отслабване на имунитета.

Ако лекарят подозира, че пациентът има фалшиво положителен резултат за реакцията на Вассерман, той може да му предпише редица допълнителни изследвания, които обикновено се използват при диагностицирането на полово предавани болести..

Болести и случаи, при които лекарят може да предпише кръвен тест за RW

  • Сифилис.
  • Предполагаем сифилис при хора в контакт с пациенти със сифилис.
  • Бременност.
  • Наркомания.
  • Аборт.
  • Треска, придружена от увеличаване на регионалните лимфни възли.
  • Първоначално посещение на клиниката.
  • Болничен прием за лечение.
  • Лечение в психиатрична или неврологична болница.
  • Даряване на кръв, тъкани, сперма и други телесни тайни.
  • Работа в сектора на услугите, търговията, медицинското обслужване, социалната и образователната сфера.

Процедура за изследване на RW кръв

Кръв на RW се дава само на празен стомах. Последното хранене трябва да бъде не по-късно от 6 часа преди теста. Здравният специалист затваря пациента или го поставя на диван и извлича 8-10 ml кръв от лакътната вена.

Ако анализът е необходим за кърмаче, тогава оградата се извършва от черепната или югуларната вена.

Подготовка с доставка на кръвен тест за RW

Трябва да спрете да пиете алкохол 1-2 дни преди теста. Също така не се препоръчва да ядете мазни храни - те могат да изкривят резултата. В подготовката за анализа трябва да се въздържате от приема на лекарства с дигиталис.

Противопоказания

Резултатът от анализа ще бъде невярен, ако:

  • пациентът има повишена телесна температура,
  • човек е болен от инфекциозно заболяване или току-що е имал,
  • жената има период на менструация,
  • бременна през последните седмици преди раждането,
  • първите 10 дни след раждането,
  • първите 10 дни от живота на бебето.

Тълкуване на резултатите от анализа

При първичен сифилис реакцията на Вассерман става положителна на 6-8 седмици от хода на заболяването (в 90% от случаите), като се забелязва следната динамика:

  • през първите 15-17 дни след инфекцията реакцията при повечето пациенти обикновено е отрицателна;
  • на 5-6-та седмица от заболяването, при около 1/4 от пациентите, реакцията става положителна;
  • на 7-8 седмици заболяване, RW става положителен в повечето.

При вторичен сифилис RW винаги е положителен. Заедно с други серологични реакции (RPHA, ELISA, RIF), той позволява не само да се идентифицира присъствието на патогена, но и да се установи приблизителното време на инфекцията.

С развитието на сифилитична инфекция през 4-тата седмица на заболяването, след появата на първичен сифилом, реакцията на Васерман преминава от отрицателна към положителна, оставайки такава във вторичния пресен и във вторичния рецидивиращ период на сифилис. В латентния вторичен период и без лечение, RW може да се превърне в отрицателен, така че с появата на клиничен рецидив на сифилис, той отново да стане положителен. Следователно, в латентния период на сифилис, отрицателната реакция на Васерман не показва липсата или излекуването му, а служи само като благоприятен прогностичен симптом.

При активни лезии на третичния период на сифилис, положителен RW се среща в приблизително 3/4 от случаите. Когато активните прояви на третичния период на сифилис изчезнат, той често се превръща в отрицателен. В този случай отрицателната реакция на Васерман при пациенти не показва, че те нямат сифилитична инфекция..

При ранен вроден сифилис RW е положителен в почти всички случаи и е ценен метод за проверка на заболяването. При късен вроден сифилис резултатите му съответстват на получените през третичния период на придобит сифилис.

От голямо практическо значение е изследването на реакцията на Вассерман в кръвта на пациенти със сифилис, подложени на лечение. При някои пациенти, въпреки енергичната антисифилитична терапия, реакцията на Вассерман не се превръща в отрицателна - това е така нареченият серорезистентен сифилис. В този случай няма смисъл безкрайно да се провежда антисифилитична терапия, постигайки преход от положителна RW към отрицателна..

От горното следва, че отрицателната реакция на Васерман не винаги е признак за отсъствие на сифилитична инфекция в организма..

Положителна реакция на Вассерман е възможна при хора с редица други заболявания и състояния, които не са свързани със сифилис: туберкулоза, системен лупус еритематозус, кръвни заболявания (левкемии), проказа, пемфигус, лептоспироза, злокачествени новообразувания, коремен тиф, скарлатина, бери-бери болест, сънна болест, по време на бременност, преди или след раждане, менструация, след анестезия, след пиене на алкохол, при наркомани, прием на мазни храни, лекарства, въвеждане на чужди серуми. В такива случаи се използват други методи за изясняване на диагнозата (RPGA, ELISA, RIF). Неспецифичната положителна реакция на Вассерман при малария е много характерна, особено по време на периода на атака. Следователно, ако RW е положителен при човек без клинични прояви на сифилис и отричащ сифилитична инфекция, трябва да се има предвид маларията.

Всичко казано по-горе показва, че положителен резултат от реакцията на Вассерман все още не е безусловно доказателство за наличието на сифилитична инфекция..

Възстановяване след теста

След вземане на кръвен тест лекарите препоръчват правилна и балансирана диета, както и възможно най-много течности. Можете да си позволите топъл чай и шоколад. Ще бъде полезно да се въздържате от физическа активност и в никакъв случай не пийте алкохол..

Норми

Обикновено в кръвта трябва да се наблюдава хемолиза - това се счита за отрицателна реакция на сифилис (реакцията на Васерман е отрицателна). Ако няма хемолиза, се оценява степента на реакция, която зависи от стадия на заболяването (маркиран със знаци "+"). Трябва да се знае, че 3-5% от напълно здрави хора могат да имат фалшиво положителна реакция. В същото време, през първите 15-17 дни след инфекцията, реакцията при болни хора може да бъде фалшиво отрицателна..

Болести, при които лекарят може да назначи кръвен тест за сифилис (RW)

  1. 1. Сифилис

  • facebook
  • Twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • YouTube
  • поща

  • Онлайн диагностика
    © LLC "Интелигентни медицински системи", 2012—2020.
    Всички права запазени. Информацията за сайта е законно защитена, копирането е наказуемо от закона.

    Рекламно разположение, сътрудничество: [email protected]

    Сайтът не носи отговорност за съдържанието и точността на съдържанието, публикувано от потребителите на сайта, отзиви на посетителите на сайта. Материалите на сайта са само с информационна и информационна цел. Съдържанието на сайта не е заместител на професионални медицински съвети, диагностика и / или лечение. Самолечението може да бъде опасно за здравето!

    Серологичен кръвен тест

    Какво е серологичен кръвен тест?

    Серологичен обект - антигени и антитела

    Серологичното изследване (SI) се основава на способността на антигените и антителата да се свързват помежду си. SI ви позволява точно да идентифицирате наличието на определен вирус или бактерия при пациент, кръвна група и резус, реактивността на организма към антибиотици, автоимунни заболявания, хормонални нарушения, индивидуалната специфичност на протеините, за да определите ефективността на терапията.

    Имунната система се бори срещу патогенни микроби (антигени), попадащи в тялото с помощта на антитела, като същевременно създава свой собствен тип защита срещу всеки от вирусите, паразитите или бактериите.

    Способността на имунната система да произвежда специални вещества, които неутрализират вредните частици, е известна на учените отдавна. Но беше възможно да се види реакцията антиген-антитяло в лабораторни условия едва в края на 19 век. Установено е, че в резултат на образуването на сноп комплексите се утаяват, образувайки люспи или мътност. Такива реакции се наричат ​​аглутинация и утаяване. През 20-ти век серологията, науката за свойствата на серума, се развива бързо, откриват се нови диагностични методи, базирани на реакции антиген-антитела. Днес има много начини за идентифициране на имунните комплекси и SI е незаменима връзка в диагностиката, лечението и създаването на нови лекарства и ваксини..

    Показания за анализ.

    Серологичните изследвания се използват широко в акушерството

    Серологичните изследвания придружават съвременния човек през целия му живот. Първите тестове за откриване на определени антитела се провеждат, когато бебето е все още в утробата. Бременна жена дарява кръв за различни SI, за да определи възможен Rh-конфликт или инфекции, които могат да навредят на бременния плод. Когато се роди дете, се очаква серологични тестове за диагностициране на вродени заболявания. Впоследствие се правят тестове по следните причини:

    • вирусни, бактериални, паразитни инфекции;
    • идентифициране на активност, стадий на развитие на заболяването;
    • хормонални патологии;
    • безплодие;
    • автоимунни заболявания;
    • метаболитно заболяване;
    • алергии;
    • онкологични заболявания;
    • планиране на бременността, гестационен период, патология на бременни жени;
    • идентифициране на ревматоиден фактор;
    • определяне на кръвна група и Rh фактор;
    • ефективността на терапията за различни заболявания;
    • ефективност на ваксинацията;
    • предоперативен и следоперативен период, ако е необходимо да се оцени нивото на някои антитела;
    • изследване на имунното състояние на организма.

    Подготовка за изследване.

    Препоръчително е да откажете приема на лекарства в навечерието на теста.

    Тъй като серологичните изследвания обхващат широк спектър от тестове, във всеки конкретен случай може да е необходима определена подготовка, но има общи правила за преминаване на серологичен тест:

    • В деня преди проучването трябва да ограничите диетата на мазни и пържени, да изключите алкохола.
    • Последното хранене трябва да бъде завършено 10 до 12 часа преди анализа.
    • В деня на даряването на кръв не трябва да пиете кафе, чай или други напитки. Можете да пиете малки количества чиста вода.
    • Лекарствата се изключват преди анализ. Ако е невъзможно да се отмени рецепцията, трябва да предоставите на лекаря пълен списък с лекарства, включително витамини, орални контрацептиви.
    • Всички останали изследвания или медицински манипулации се извършват след SI.
    • Препоръчително е да спрете пушенето 12 часа преди вземане на кръвна проба.
    • През предходния ден трябва да се избягва физически и емоционален стрес и преди проучването е препоръчително да седнете 15 минути в пълна почивка.
    • SI се предписват сутрин и се дават на гладно.

    Методи за серологично изследване.

    В серологията могат да се приложат най-различни методи

    Всички методи за определяне на комплекси антиген-антитела (Ag-Ab) се основават на използването на известен Ag или Ab в търсенето на неизвестното. Ако е необходимо да се открие Ar, са необходими диагностични имунни серуми със съдържанието на специфичен Ab. Ако целта на SI е да открие Ab, се използват диагностикуми - суспензии, съдържащи определени Ag.

    Серологичните тестове могат да отразяват качествен или количествен резултат. При качествено проучване резултатът може да бъде отрицателен или положителен, тоест желаният елемент или е намерен, или не. Количественото общо се изразява като цифрова стойност или чрез знаци "+" (обикновено от един до четири).

    Непряката хемаглутинация е един от диагностичните методи

    Методи за серологично изследване:

    • Аглутинация. Свързването на Ab с Ar, последвано от образуване на люспи или утайка. За откриване на антитела в серума се използват преки, непреки, подробни, индикативни реакции.
    • Хемаглутинация. Използват се еритроцити с адсорбирани върху тях Ag или Ab, които се залепват към съответните Ab и Ar. Образуваните комплекси изпадат под формата на фестонна утайка.
    • Валежи. Образуване на комплекс Ag-Ab с последващо утаяване под формата на мътност, наречена утайка.
    • Коаглутинация. Откриване на Ag посредством Ab, адсорбирано върху протеин на стафилококови клетки.
    • Инхибиране на хемаглутинацията. Антисерумните антитела потискат вирусните антитела, в резултат на което вирусите губят способността си да се придържат към еритроцитите.
    • Косвена реакция на Кумбс. Ab на повърхността Ag на еритроцитите се определя.
    • Пръстенни валежи. Провежда се на основата на имунен серум с наслояване на разтворим Ag.
    • Двойна радиална имунодифузия. Реакцията се основава на дифузията на компонентите на антисерума и Ag в ямките на агара или агарозата.
    • Реакция на свързване на комплемента. Връзката между Ag и Ab е придружена от адсорбцията на комплемента; овчи еритроцити и Ab към тях в състава на хемолитичния серум се използват като индикатор.
    • Неутрализация. Въз основа на неутрализиране на вирусния агент с антитела.
    • Реакции, базирани на маркиране на Ab и Ar с флуоресцентен или ензимен състав - имунофлуоресцентен (RIF) и ензимно-свързан имуносорбентен (ELISA) методи.

    Метод на имунофлуоресценция.

    "Светят" в микроскоп с тъмно поле

    Този метод се основава на използването на Ab, маркиран с флуоресцентно вещество. Най-често като етикет се използва флуоресцеин изотиоцианат, който има зелено сияние в ултравиолетовите лъчи. Резултатът от анализа се оценява по степента на яркост на сиянието. Метод за ръчно определяне може да се използва с помощта на флуоресцентен микроскоп, оптичен микроскоп с луминесцентна приставка, както и автоматичен метод, използващ микрочип цитометър, поточен цитометър или роботизиран флуоресцентен микроскоп..

    RIF се извършва по преки и непреки методи. Директният метод означава директно свързване на сорбиран Ar с белязан Ab. Индиректният метод включва използването на немаркиран Ab за свързване с Ar и след това добавянето на белязан Ab, което избягва неспецифични реакции.

    Свързан имуносорбентен анализ.

    Имуноанализ като метод за серологична диагностика

    ELISA се основава на идентифицирането на Ag-Ab комплекси чрез етикетиране на един от компонентите. Като етикет се използват различни ензими, които образуват цвят в резултат на ензимна реакция. Съществуват различни ELISA методи, те могат да бъдат класифицирани като хомогенни и хетерогенни методи..

    Хомогенно означава, че всички етапи на реакцията се провеждат в разтвор.

    Хетерогенните методи включват разделяне на фази с използване на твърда среда.

    Хомогенно-хетерогенните методи се основават на факта, че Ar-Ab комплексите се образуват в разтвор и след това твърдата фаза се използва за разделяне..

    Има много вариации на методите ELISA, някои от тях са представени по-долу..

    1. Сандвич метод. Към имобилизирания Ab се добавя разтвор с Ar, след образуването на комплекси, носителят се измива от излишните компоненти и се добавя белязаният Ab. В резултат на това Ar се улавят, обездвижват се и се маркират с Ab, откъдето идва и името на метода..
    2. Неконкурентна непряка ELISA. Тестът серум с Ab се добавя към имобилизирания Ag. Когато се образуват комплекси, излишъкът Ab се измива и се добавя маркиран Ab, който може да се свърже с имунните комплекси, прикрепени към повърхностите на кладенците..
    3. Конкурентен директен ELISA. Тестът на серума и конюгатът, съдържащ белязания Ab, се добавят към имобилизирания Ag. Образуват се няколко типа комплекси Ag-Am: с маркиран Ab и с немаркиран Ab, които се конкурират помежду си за връзката с Ar.

    Какви инфекции помага серологичният тест да идентифицира?.

    Серологичната диагноза ви позволява да идентифицирате патогена

    Ако пациентът има определени симптоми или други изследвания показват заболяване, се предписва серологичен тест.

    Серологичните тестове се използват за диагностициране на следните инфекции:

    • вирус на хепатит A, B, C, D, E;
    • сифилис;
    • ХИВ;
    • херпес;
    • цитомегаловирус;
    • рубеола;
    • дребна шарка;
    • паротит;
    • Епщайн-Бар;
    • Хеликобактер;
    • хламидия;
    • микоплазма;
    • токсоплазма;
    • ламблия;
    • хелминти;
    • уреаплазма;
    • парвовирус;
    • вирус на варицела;
    • вирус на енцефалит, пренасян от кърлежи;
    • Вирус на денга;
    • коклюш;
    • борелия;
    • легионела.

    Предимства на метода на серологичните изследвания при диагностициране на инфекции.

    Серологична диагностика - бърза и достъпна

    Кръвни тестове

    В началото на 20-ти век немският имунолог Август Васерман открива серологична реакция, която все още се използва за диагностициране на сифилис и носи неговото име под формата на съкращението RW. Кръвен тест за реакция на Васерман е включен в списъка на задължителните проучвания, които се провеждат за бременни жени и преди всякакви хирургични процедури.

    Характеристики на реакцията на Вассерман

    За какъв анализ става въпрос се обяснява от гледна точка на имунологията. Изследването се извършва по метода на RSK - реакцията на свързване на комплемента. Комплементът е група специфични протеини, които участват в сложна каскада от имунни отговори. Те са част от вродения и придобит имунитет. Системата на комплемента е неактивна, докато не се активира от чужд протеин, произведен от нахлуващи микроорганизми.

    Класическият път на активиране възниква след контакт с бактерия. Повърхността има свои антигенни протеини. Те са чужди на човешкото тяло; в отговор се произвеждат протеини на антитела. Допълнението е необходимо за стимулиране на антитела и след образуването на комплекс с антигени, микроорганизмът става видим за имунните клетки на макрофагите. Те абсорбират бактериите и насърчават заздравяването.

    При заразяване с бледа трепонема, причинител на сифилис, в организма се образуват антитела, които се задържат дълго време. По тяхната концентрация можете да определите фазата на заболяването, която се показва чрез RW кръвен тест.

    Анализът на Васерман изисква 5 компонента:

    • диагностициран антиген;
    • диагностични антитела;
    • индикатор антиген - овчи еритроцити;
    • индикаторни антитела - заешки хемолизини;
    • допълнение.

    По време на стадирането на реакцията се изискват 2 системи антиген-антитела, едната от които е индикатор, а втората е специфична. Обикновено взаимодействието на антиген и антитяло е придружено от свързването на комплемента, докато се образува комплекс, който не се забелязва визуално. Следователно е необходима индикаторна хемолитична система. Серумът сенсибилизира еритроцитите, прави ги чувствителни към действието на комплемента. Следователно, в негово присъствие настъпва хемолиза - разпадането на червените кръвни клетки, разтворът се оцветява.

    Тълкуването на резултатите от кръвен тест за RW се основава на тежестта на хемолизата. Ако решението е запазило първоначалното си прозрачно състояние, тогава цялото допълнение се е свързало с определена система. Това е индикатор за появата на комплекси антиген-антитела, което показва, че в кръвния серум има антигени на сифилис и в организма са се образували антитела към тях. Този резултат е положителен.

    При липса на специфични антитела към антигена в кръвта, техните комплекси не се образуват, а комплементът не се активира и остава свободен. Той се свързва с индикаторните протеини, причинява хемолиза на еритроцитите и сместа в епруветката става червена, което означава, че кръвният тест за RW е отрицателен.

    Кръвният тест за RW се извършва в лаборатория при стерилни условия. Използваните биологични материали и кръвта на пациента се подготвят внимателно, титруват се в различни съотношения с комплемент, добавяйки от 0,5 до 0,05 ml от този протеин. Според интензивността на реакцията във всяка епруветка се оценяват резултатите от реакцията.

    За кого се препоръчва изследването?

    Сифилисът е опасна полово предавана инфекция. След инфекцията първите симптоми често остават незабелязани. В местата на проникване на патогена се появяват язви. При жените те могат да се появят във влагалището, на шийката на матката, в ректума или в устата. Те не са придружени от дискомфорт, болезненост или специфично отделяне..

    Ако патогенът е върху кожата на слабините, срамните устни или перинеума, тогава сифиломите се локализират на същите места. Язвите не са придружени от сърбеж, не се отлепват и изчезват сами безследно. На тяхно място не се образува белег или пигментация. Затова хората не ходят на лекар..

    Следователно, законодателно е въведен задължителен експресен кръвен тест за RW, който се извършва в следните ситуации:

    • всички бременни жени при регистрация, както и малко преди раждането;
    • преди всякакви инвазивни процедури, хирургични операции, включително минимално инвазивни;
    • по време на задължителния професионален изпит по време на работа, както и годишни изпити.

    При бременни жени изследването може да се извърши допълнително в средата на гестационния период, което е свързано с особеностите на образуването на антитела. Ако една жена е получила трепонема малко преди бременността или в началния етап, имунната система няма да има време да реагира, анализът ще бъде отрицателен.

    Гинеколог ще ви насочи към RW, ако една жена при преглед разкрие безболезнена язва на гениталиите, увеличени ингвинални лимфни възли. Дерматолог или терапевт ще се обърне към проучването за пациенти, които се оплакват от увеличени лимфни възли и язви на гениталиите, както и появата на бледо обрив по тялото. Препоръчва се да се подложите на самостоятелен преглед в случай на непринуден полов акт, но не по-рано от 3-4 седмици след предполагаемата инфекция. Това се дължи на особеностите на имунния отговор и инкубационния период на трепонема..

    Особености на хода на сифилис и образуването на антитела

    Сифилисът се отнася до инфекции, предавани по полов път, инфекцията възниква, когато секретите от гениталния тракт на болен човек влязат в контакт със здрав човек. За въвеждането на трепонема е достатъчно да се получи върху кожата, така че първичните елементи често се появяват около ануса, върху лигавицата на устата и на други места, където е настъпил контакт.

    Инкубационният период може да продължи от седмица до 190 дни и зависи от индивидуалните характеристики на имунната система. Той е съкратен при жени, които са заразени едновременно от два източника, но може да се увеличи, ако на етапа на възпроизводство на патогени са били лекувани антибиотици от друго инфекциозно заболяване.

    От момента, в който се появи твърд шанкър, започва първичен сифилис. Средно трае 6-7 седмици и е разделен на 2 периода:

    • серонегативен - кръвен тест за RW, извършен по микрометод, а други видове реакции ще бъдат отрицателни;
    • серопозитивна - реакцията на Вассерман става положителна, настъпва 3-4 седмици след появата на твърд шанкър.

    Следователно, при изследване на пациенти със съмнение за първичен сифилис или твърд шанкър, отрицателният RW е причина да се повтори анализът след няколко седмици. Ретроспективно е възможно да се установи предписването на инфекцията, да се проследят сексуалните контакти или да се намери сексуалният партньор, който е станал източник на инфекцията.

    Понастоящем разделянето на серонегативен и серопозитивен период се използва рядко, тъй като се появиха съвременни диагностични методи, при които патогенът, неговата ДНК или антитела могат да бъдат открити в рамките на няколко седмици след инфекцията.

    Вторичният сифилис се развива 6-7 седмици след първичния. Причинителят хематогенно се разпространява в тялото, засяга вътрешните органи и се появява обрив по кожата. Този период е разделен на три други:

    • ранен или пресен - първичен обрив по кожата, антителата вече са развити в тялото;
    • рецидивиращ - обривът се появи отново поради отслабване на имунната защита;
    • латентна - болестта преминава в латентна форма, която не се появява навън.

    Третичният сифилис се развива след много години от съществуването на болестта без лечение. В днешно време, поради широкото използване на антибиотици и общата диагностика, това е много рядко. Характеризира се с увреждане на нервната система, костите, хрущялите, вътрешните органи.

    Образуването на антитела става на етапи. В ранен стадий на заболяването се появява IgA, след появата на твърд шанкър се открива IgM и след известно време IgG. Особеността на хода на заболяването е, че при третичен сифилис имунният отговор става много слаб и антителата може да не бъдат открити при анализа на RW.

    Как да се подготвим за проучването и какво влияе върху точността на анализа

    Преди да вземете теста, трябва да получите препоръка от Вашия лекар. Изследването не се провежда анонимно, тъй като сифилисът е заболяване, което изисква задължителен полов акт и лечение на сексуални партньори. Това е възпираща мярка за спиране на разпространението на болестта..

    Не се изисква специална подготовка за анализ. За откриването на антитела няма значение дали кръвта се взема на гладно или не, но лекарите препоръчват да не се яде сутрин, а вечер да се отказва алкохол и мазни храни. Това стимулира черния дроб, отделянето на жлъчка в лумена на червата и увеличаване на липидите в кръвта. При опит за получаване на серум ще бъде открита хилеза, която няма да позволи анализ.

    По време на бременност на жената също не се препоръчва да яде, но е позволено да пие вода. Ако състоянието на глад се понася лошо, е необходимо да вземете бонбони или шоколад в клиниката, за да ядете веднага след даването на кръв.

    Събиране на биологичен материал

    За класическия тест за RW трябва да бъде дарена венозна кръв. Най-често се взема от огъването на лакътя, но се допускат и други достъпни съдове. Вената, от която се взема кръвта, се изстисква предварително с турникет над мястото на пункцията. Пациентът е помолен да стисне и отпусне юмрука, за да увеличи притока на кръв от артериите. Лаборантът ще обработи кожата с антисептичен разтвор и ще изтегли 5-10 ml кръв в стерилна спринцовка.

    За по-нататъшни изследвания серумът се получава от кръвта; това трябва да се направи възможно най-скоро, за да не настъпи активиране и коагулация на фибриноген. Следователно образуваните елементи се утаяват и след добавянето на калциеви йони фибриногенът става неактивен. В същото време антителата не изчезват никъде, така че биологичният материал е подходящ за анализ.

    Резултати от реакцията на Васерман

    Анализът на RW отнема около един ден. Съвременните методи за изследване, които постепенно заместват реакцията на Васерман по отношение на готовността, са приблизително еднакви. Но други изследователски методи дават точен резултат още на ранен етап от появата на антитела или правят възможно идентифицирането на ДНК на патогена, поради което кръвта върху RW се взема по-рядко.

    По време на рутинен преглед преди операцията е необходимо да се вземе предвид колко дълго е валиден кръвният тест за RW, така че в деня на хоспитализацията да не се налага да преглеждате отново и да чакате резултатите от него. Тестът е валиден 2 месеца, както и тестове за ХИВ и хепатит. Но в случаите, когато анализът се подава по време на предоперативна подготовка, лекарите препоръчват да го вземете един месец преди очакваната дата на операцията или манипулацията, така че, ако резултатът е положителен, би било възможно да се подложи на лечение и повторен преглед..

    Положителен резултат

    Колко се прави кръвен тест за RW зависи от характеристиките на лабораторията, но най-често резултатът е готов на следващия ден. Изследването е насочено към определяне на общите имуноглобулини от клас М и G, само в този случай се получава положителен резултат. Но в заключение можете да намерите различни стойности, които определят броя на знаците "+" в размер от 1 до 4. Колкото повече плюсове, толкова по-силна е реакцията на Вассерман, толкова повече антитела има пациентът.

    В дерматовенерологичния диспансер, където трябва да отидете, ако резултатът е положителен, ще бъдат предписани допълнителни тестове за потвърждаване или отказ на диагнозата. Ето защо, когато получавате положителен отговор по време на първоначалното проучване, не се паникьосвайте, това не означава заболяване.

    Положителен тест за RW се появява при следните условия:

    • със свеж сифилис или по време на първичния серопозитивен период;
    • с вторичен серопозитивен сифилис, ако инфекцията е възникнала преди повече от 3 месеца;
    • с третичен сифилис през серопозитивния период;
    • ако е минала по-малко от година от лечението;
    • със серорезистентност след лечение на заболяването.

    Кръвен тест за RW се използва не само за диагностициране на сифилис, но и антифосфолипиден синдром. Това е заболяване, което най-често се среща при жените и се характеризира с образуването на антитела към фосфолипидите. Те атакуват ембриона, което води до повтарящи се спонтанни аборти и ранни аборти. Но кръв за RW може да бъде дарена за диагностициране на антифосфолипиден синдром, ако се потвърди липсата на сифилис.

    Отрицателен резултат

    Формата за отговор на лабораторията може да показва, че резултатът е отрицателен, което означава, че няма антитела. Но предвид особеностите на патогенезата на заболяването и етапите на образуване на антитела, такова заключение не винаги е показател за здравето.

    Ако вземете теста през първите 3-4 седмици след полов акт, по време на който може да е настъпила инфекция, в тялото има само имуноглобулини от клас А, които не се откриват по време на анализа за RW. В ранния серонегативен период, когато първите симптоми на заболяването вече са налице, липсва и пълният набор от антитела, необходими за положителен резултат. Следователно, на пациенти със съмнение за сифилис, но с отрицателен резултат от изследването, се предписват допълнителни тестове или повторно изследване след няколко седмици..

    Отрицателен резултат може да бъде, когато човек е развил третичен стадий на патология. В този случай има изразени характерни признаци на повреда:

    • нервна система;
    • аортата и други големи съдове;
    • гръбначен мозък;
    • кости и мускули;
    • лигавици;
    • епидермис.

    Такива пациенти страдат от памет, внимание и мислене. Диагнозата на третичния сифилис въз основа на резултатите от теста е трудна.

    Невярен резултат

    При възрастни тестът за RW, който е положителен, не винаги показва инфекция. Съществува концепция за фалшиво положително проучване, което е свързано с особеността на кръстосано реагиращите антитела. Фалшивите RW могат да се наблюдават при следните условия:

    • по време на бременност;
    • при пациенти със захарен диабет;
    • с туберкулоза;
    • при пациенти с рак;
    • страдащите от хроничен алкохолизъм;
    • с инфекциозна мононуклеоза;
    • увреждане на черния дроб с вирусен хепатит;
    • с пневмония;
    • при пациенти с автоимунни заболявания;
    • наркозависими;
    • с подагра;
    • след инфекция с ентеровирус;
    • след скорошна ваксинация.

    Тези състояния или заболявания се характеризират с напрежението на имунната система, образуването на голям брой антитела, които са в състояние да реагират с комплемент в анализа на RW. Следователно пациентите с фалшиво положителен резултат изискват допълнителни изследвания. Бременните жени, които получават положителен RW, се тестват по различен начин. Понякога се получава фалшиво положителен резултат при заразяване с други видове трепонема, които не са свързани с причинителите на сифилис.

    Алтернативни методи за изследване

    Реакцията на Вассерман се разчита по остарял метод за изследване, поради което тя рядко се използва. Той беше заменен от други, по-точни методи, те обикновено се наричат ​​RW 2 анализ или експресен метод. В някои клиники формулярите продължават да наричат ​​RW сифилис тест, независимо от вида на използваната реакция.

    Всички методи за откриване на сифилитична инфекция са разделени на директни, които позволяват да се открие бледа трепонема, и непреки, базирани не на търсенето на антитела към патогена. В ранните етапи, когато човек има язвен шанкър или обрив по кожата, може да се вземе проба от патологични огнища. Изследванията могат да бъдат направени по три начина:

    1. PCR - методът ви позволява да откриете ДНК на патогена, а при използване на PCR в реално време броят на микроорганизмите се отразява. Но за диагноза е достатъчно да се получи потвърждение за наличието на микроорганизма. Изследване неефективно за третичен сифилис.
    2. Микроскопия в тъмно поле - насочена към откриване на живи трепонеми в изследвания материал. Лаборантът може да види характерна спирална микробна клетка, която прави транслационни движения, надеждността на метода е 100%, но резултатът няма да работи, ако има кръв, гной в материала или изразено възпаление във фокуса.
    3. RIT тестът е скъп биологичен тест, за който лабораторните животни са замърсени с материал от болен човек, резултатът от теста трябва да изчака няколко седмици, така че изследването не се използва за ранен скрининг.

    Със заповед на Министерството на здравеопазването на Руската федерация за диагностициране на сифилис трябва да се използват следните методи:

    1. Микрореакцията на валежите е най-простият и бърз метод за изследване, който се състои в образуването на имунни комплекси с антитела в кръвта на пациента, те се утаяват под формата на бели люспи.
    2. RPHA е директна реакция на хемаглутинация, степента на чувствителност на метода е 100%, но при възпалителни заболявания може да има фалшив резултат.
    3. RIF - имунофлуоресценция, проведена с маркирани антитела, на практика се използва рядко поради високата цена.
    4. RIBT - обездвижване на бледи трепонеми, скъпо проучване, използвано в редки случаи.
    5. ELISA е ензимно свързан имуносорбентен анализ, евтин и силно специфичен диагностичен метод, понякога дава фалшиви резултати, като в този случай се извършва повторно изследване.

    Задължителният списък не включва Western blot тест. Диагностичният метод се използва в съмнителни случаи, когато се изисква задълбочено проучване. За получаване на резултат е необходима поредица от продължителни реакции, така че анализът отнема около 7 дни.

    Кръвният тест за RW може да диагностицира сифилис и да започне лечение, за което се използва пеницилин. Този метод на изследване постепенно придобива исторически характер и на негово място са модерни и бързи експресни тестове..