Алгоритъм 7 определяне на кръвна група с tsoliclones

Определяне на кръвната група с анти-А и анти-В соликлони

1 Въведение: Извършваме определяне на кръвна група с tsoliclones в процедурната стая, както е предписано от лекаря. Нося шапка, очила, маска, халат, престилка, ръкавици. Ръцете са предварително обработени хигиенно.

2 Оборудване:

Цоликлони анти-А, анти-В

Изследване на кръв (епруветка)

Табелка за набиране на кръв.

Стерилни стъклени пръчки 2 бр. (В чаша, чаша Петри)

Изотоничен разтвор на натриев хлорид

Стерилна пипета 1 бр.

Стерилен капиляр с круша.

Контейнер с 3% разтвор на хлорамин.

3 Техника на манипулация:

Поставете tsoliclones в отделни ямки по една голяма капка в даден момент.

Въведете малки (0,01 ml) капки кръв с капиляр до капки tsoliclones, като избягвате контакт между капиляра и кръвта.

Смесете цоликлони и кръв с отделни пръчки.

Разклатете чинията, наблюдавайте аглутинация в продължение на 2,5 минути.

Пипетирайте в ямките, в които е настъпила аглутинация на 1-ва капка физиологичен разтвор

Мърдай, гледай аглутинация.

При определяне на кръвната група с помощта на цоликлони...

Не се наблюдава аглутинация в нито една от ямките - първата група

Аглутинация се наблюдава с анти-А цоликлон - втората група

Аглутинация се наблюдава с анти-В tsoliclon - третата група

Аглутинация се наблюдава с анти-А и анти-В соликлони - четвъртата група

След манипулацията всички използвани предмети се накисват в контейнер с 3% разтвор на хлорамин.

4 Възможни грешки:

Не се използва защитното оборудване на здравния работник.

Повторно използване на пръчки.

Прехвърляне на пръчки в контакт с кръв през тавата с чисти пръчки.

Несъответствие на модела на аглутинация със заключението за групова принадлежност.

Предмети, които са влезли в контакт с кръв, не са дезинфекцирани.

Не гафове:

Време за изчакване на аглутинацията по-малко от 2,5 минути.

Към ямките, в които е настъпила аглутинация, не се добавя физиологичен разтвор.

Придържане на пръчки за краищата, а не за центъра.

5 Критерии за оценка:

Pass - без груби грешки, не повече от две негруби грешки.

Не премина - наличие на груби грешки, наличие на повече от две негруби грешки.

Ако се допусне груба грешка, учителят може да ви помоли да повторите съответния етап от манипулацията. Ако грешката се повтори, тя не е преминала. Не е позволено повече от едно повторение.

Циклони за определяне на кръвната група

Определянето на кръвната група чрез tsoliclones е проста процедура, която се извършва в лаборатория. Той се основава на химическа реакция между моноклонални серуми и аглутиногени. В резултат на това е възможно да се установи не само кръвната група, но и нейният резус фактор и тези методи се считат за най-прости, точни и достъпни. Веществата се продават в удобни бутилки с различни размери и са оборудвани с дозатор за капкомер. Анализът отнема минути, така че лабораториите могат да обработват огромно количество проби през целия ден.

Какво представляват tsoliclones?

Золиконите са моноклонални антитела, които се намират във физиологичен разтвор. Веществото получи името си в чест на изобретателите си - Централният орден на Ленин институт, днес преименуван на Изследователски център по хематология. Те са представени от течност, която се продава в бутилки от 5 и 10 ml. Това е универсален реагент за хематологични изследвания, тъй като ви позволява да определите кръвната група както в системата AB0, така и в системата Rh..

Има 3 основни вида цоликлони:

  • анти-А - червена течност;
  • анти-В - синьо вещество;
  • анти-D - прозрачен реагент за определяне на Rh фактор.

За определяне на кръвната група се използват анти-А и анти-В цоликлони. Те влизат в биохимични реакции с аглутиногени, които се намират на повърхността на червените кръвни клетки - червените кръвни клетки. Еритроцитите от кръвна група А съдържат аглутиноген А, който ще реагира с анти-А цоликлон. По подобен начин се определя съдържанието на аглутинген В. Положителен резултат от реакцията е адхезията на еритроцитите и тяхното утаяване.

Процедура за типизиране на кръв

Процедурата за определяне на кръвна група с помощта на цоликлони е много проста и се извършва за няколко минути. Тя ще изисква нативна („жива“) капилярна кръв, наличието на консервант в нея е разрешено. Ще ви трябва и таблетка - равна стъклена повърхност, върху която ще протече реакцията. Процедурата се извършва съгласно определен алгоритъм:

  1. нанесете две големи капки цоликлони върху повърхността на плочата (обикновено анти-А реагентът е вляво, а анти-В реагентът е вдясно);
  2. добавете малки капки кръв, които ще бъдат 10 пъти по-малки по обем от реагентите;
  3. внимателно преместете таблетката, така че кръвта да се смеси с разтвора, но двете капки не се комбинират помежду си;
  4. наблюдавайте резултатите след няколко минути.

За установяване на групата е подходяща и кръв с добавка на консервант. Простотата на техниката обаче позволява тя да се извършва на място веднага след вземане на биологичния материал. Достатъчно е да се изтегли малко количество капилярна кръв от пръст, така че да е напълно достатъчно за анализ.

Декодиране на резултатите

Резултатите могат да се наблюдават няколко минути след комбинирането на реагентите. Пълното смесване на течности показва липса на реакция, а аглутинацията се проявява чрез появата на червени съсиреци в бистър разтвор. Това са червени кръвни клетки, които се слепват, когато влязат в контакт с несъвместими моноклонални антитела. След това можете да дешифрирате резултатите, като използвате прост алгоритъм:

  • Група 1 (0) - аглутинацията отсъства и в двете капки, тъй като върху еритроцитите няма аглутиногени;
  • Група 2 (А) - реакцията се наблюдава при първата капка с анти-А цоликлон;
  • Група 3 (В) - във втората капка еритроцитите се слепват при контакт с анти-В реагента;
  • Група 4 (AB) - появата на червена утайка и в двете капки.

Четвъртата кръвна група се счита за най-рядката, следователно, когато се появи аглутинация и в двете дупки, анализът се повтаря. Освен това към нормалния физиологичен разтвор трябва да се добави кръв, за да се елиминира възможността от опасни заболявания. При здрав човек той няма да реагира по никакъв начин с физиологичен разтвор и еритроцитите няма да се слепват.

Определяне на Rh фактора

За да определите Rh фактора, ви е необходим анти-D цоликлон. Той е безцветна течност и се продава също в малки бутилки с дозатор. За провеждане на реакцията е достатъчна още една капка кръв, която се поставя отделно върху плочата. Процедурата се извършва по следната схема:

  1. нанесете 0,1 ml капка анти-D tsoliclon върху стъклото;
  2. добавете капка кръв до него, чийто обем е 0,01 ml;
  3. комбинирайте двете течности със стъклена пръчка и внимателно разбъркайте стъклото, така че кръвта да се смеси с реагента;
  4. фиксирайте резултата след 3 минути.

Първите резултати могат да се видят след 15 секунди, но е важно да изчакате 3 минути, за да установите крайния резултат. Наличието на резултат, тоест появата на реакция на аглутинация, показва, че Rh фактор е положителен, липсата му показва отрицателен Rh.

Полезни съвети

Определянето на кръвната група и Rh фактора с помощта на цоликлони се счита за един от най-простите и достъпни методи, поради което се използва широко в лаборатории от различни нива. Освен това този анализ дава надеждни резултати. В някои случаи обаче те са неверни и причината за това е неспазване на няколко правила. Простите инструкции за използване на цоликлони и работата с тях ще ви позволят да избегнете получаването на ненадеждни резултати и необходимостта от провеждане на изследването отново:

  • съхранявайте реагентите в хладилник при температура от 2 до 8 градуса и използвайте незапечатаната бутилка в рамките на 30 дни;
  • изследванията се извършват при стайна температура, а в твърде горещо помещение се препоръчва периодично да се охлажда стъклената повърхност на таблетката;
  • маркирайте различни цоликлони върху таблетката с маркер, тъй като цветът им бързо изчезва след добавяне на кръв;
  • спазвайте правилните пропорции на реагентите: ако има твърде много кръв, реакцията на еритроцитна аглутинация ще бъде слабо изразена;
  • не позволявайте смесване на течни капчици, в които вече присъстват различни видове цолкиклони - в този случай реакцията ще трябва да се повтори;
  • посочете крайния резултат не по-малко от 3 минути след началото на реакцията.

Също така е важно да се спазва последователността на действията по време на анализа. Така че, ако стъклената повърхност не се люлее, дори да няма реакция на адхезия, еритроцитите ще бъдат разположени в крайната зона на капката. Това може да доведе до погрешно тълкуване на резултатите. При определяне на кръвната група е необходимо да се вземат предвид острите и хронични заболявания, които се наблюдават при пациента. При патологии на черния дроб и органите на хемопоетичната система, както и заболявания, протичащи като сепсис, може да възникне патаглутинация. Червените кръвни клетки ще се слепват, дори ако влязат в контакт с нормален физиологичен разтвор. За разлика от това, при левкемия, кръвните клетки няма да реагират на наличието на антитела и няма да настъпи аглутинация..

Циклоните са важни реактиви, които се използват ежедневно в хематологичните лаборатории. Те ви позволяват бързо и точно да определите кръвната група и нейния Rh без допълнително оборудване и специални умения. Важно е обаче да се следва прост алгоритъм, така че резултатите от анализа да са наистина надеждни..

Определяне на кръвни групи с помощта на цоликлони

Определяне на кръвната група с помощта на алгоритъм tsoliclones и интерпретация на резултатите

Определянето на групата еритроцитни антигени и резус фактор отдавна е едно от задължителните проучвания за повечето пациенти, приети на болнично лечение. Може да се извършва на всяко ниво на медицинско обслужване, при наличие на необходимите реактиви и инструменти..

Обикновено определянето на групата се извършва с помощта на стандартни серуми, въпреки че се конкурира с друг метод, подобен на референтния метод - използването на цоликлони.

Tsoliclon е генно инженерно моноклонално антитяло. Най-често за получаването му се използват мишки - на животното се инжектира специален антиген и след това се получава асцитната течност на гризача, която съдържа тези антитела.

Морфологично те принадлежат към клас М имуноглобулини, т.е. антитела от острата фаза. Механизмът им на действие се дължи на образуването на комплекс антиген-антитяло, където някои молекули действат като антиген (в тази ситуация протеини, които определят кръвната група и нейния резус), разположени върху клетъчната мембрана.

Какви са препаратите на цоликлони

В момента в лабораторната диагностика се използват 3 вида стандартни цоликлони - анти-А, анти-В и анти-АВ. Всеки от тях реагира със специфичен за него антиген, предизвиквайки развитието на имунен отговор.

Тези лекарства се предлагат под формата на ампули или флакони, съдържащи 5 или 10 ml разтвор на антитела. Всички те имат специфичен цвят, според който се определя всеки тип:

  • анти-А е оцветен в червено;
  • анти-В се предлага под формата на син разтвор;
  • комбинираният анти-АВ (или анти-D) цоликлон няма специфичен цвят.

Tsoliklon anti-AB може да бъде модифициран и използван за определяне на Rh фактора.

Алгоритъмът за изследване е съвсем прост, не се изисква специална подготовка за изследването от пациента.

Определянето на групата може да се извърши в естествена кръв със или без консервант. За изследване се взема капилярна кръв от пръста на пациента.

За да се получи надеждна информация е задължително да се спазват условията на околната среда: анализът се извършва в добре осветено помещение с умерена влажност и температура най-малко 20 градуса.

Освен това трябва да се уверите, че кръвта е взета от пациента правилно и че използваните реагенти все още не са изтекли..

Върху специална плака (или плоча), на разстояние един от друг с помощта на специална пипета, се нанася по 1 голяма капка от всяко от антителата (за удобство е по-добре да ги поставите така - A, B, AB). Близо до всяка от капки цоликлони е необходимо да се постави една капка кръв под тест и постепенно да се разбърква, докато се разклаща таблетката.

Визуално резултатите от изследването могат да бъдат определени в рамките на 5-10 секунди след началото на анализа. В изследваната кръв се намират така наречените „червени конгломерати“ - залепени еритроцити. Те се образуват в резултат на реакция на аглутинация, т.е. в случая, когато цоликлонът съответства на антигена (включително в изследването за Rh фактор). Ако не се наблюдава аглутинация, тогава съответно има несъответствие между изследваните антигени и наличните антитела.

Как се извършва оценката на резултатите от изследването и определянето на груповата принадлежност?

Както бе споменато по-горе, резултатът от изследването се определя от наличието на реакция на аглутинация визуално или с помощта на анализатори:

  • ако не присъства в никоя от капките, тогава изследваната кръв има първата група.
  • когато се наблюдава в клетката, където се намира анти-А цоликлон, това означава, че анализираната кръв съдържа този антиген. По този начин изследваната кръв може да бъде или втората (генотип AA или A0) или 4 (AB) групи.
  • ако се наблюдава аглутинация с анти-В-цоликлон, тогава изследваната кръв е 3 (BB, B0) или 4 групи.

За да се провери точността на резултатите върху плаката, се добавя анти-АВ tsoliclon (който също има способността да определя Rh фактор). Това е до известна степен контрол, тъй като по присъствието на аглутинати в него се преценява правилността на анализа. Ако реакцията е настъпила във всички клетки, тогава тестваната проба принадлежи към 4-та кръвна група.

Възможна е ситуация, когато се наблюдава аглутинация с анти-АВ tsoliclone, но не и в други проби. В този случай можем да говорим за неправилно проведен анализ и да определим отново групата и Rh фактора..

Какво да имате предвид при анализ

За да бъде резултатът от анализа възможно най-надежден, по време на процедурата трябва да се спазват редица условия:

  • реагентите трябва да се съхраняват на студено място при температура от + 2-8 градуса във флакони с плътно завита капачка (в случай на нарушаване на правилата за съхранение те бързо губят свойствата си);
  • за анализ е невъзможно да се използват цоликлони с изтекъл срок на годност (около 30 дни) или течности, които съдържат утайки, люспи или отломки;
  • изследването се извършва в добре осветено помещение при температура на въздуха най-малко +15 и не по-висока от +25 градуса и не трябва да има мръсотия, прах и други фактори, които могат да изкривят резултата;
  • при нанасяне на биоматериал и реактиви върху повърхността на таблетката, трябва точно да се спазват пропорциите - ако има твърде много кръв, реакцията е по-трудна за проследяване, а в обратния случай (с малък обем) ще бъде твърде бавна;
  • капки кръв, смесени с различни видове цоликлони, не трябва да се оставят да се слеят заедно - ако това се случи, изследването се повтаря; по същата причина трябва да се използват различни пръчки за смесване на реагентите с биоматериал.

Продължителността на реакцията трябва да бъде най-малко 3 минути и ако резултатът е съмнителен, времето за наблюдение на проби от биоматериали трябва да се удължи до 5 минути. След 10 минути обаче може да се получи изсушаване на биоматериала и естествено утаяване на еритроцитите, така че не трябва да се доверявате на такова проучване.

Реакция със стандартни еритроцити

За да реагират със стандартни еритроцити, са необходими стандартни еритроцити от три кръвни групи: 0 (I), A (II), B (III).

Метод на реакция със стандартни еритроцити

  1. Кръв за изследване се взема от вена в епруветка, центрофугира се или се оставя за 30 минути, за да се получи серум.
  2. Три големи капки (0,1 ml) кръвен серум от епруветка се нанасят върху маркирана плочка, а до тях една малка капка (0,01 ml) стандартни еритроцити от групи.
  3. Съответните капки се смесват със стъклени пръчки, плочата се разклаща, наблюдава се в продължение на 5 минути, NaCl 0,9% се добавя към капките с аглутинация и резултатът се оценява.

Оценка на резултатите от реакцията със стандартни еритроцити

Оценете резултатите, получени със стандартни изохемаглутиниращи серуми и стандартни еритроцити. Особеността на резултатите от реакцията със стандартни еритроцити - еритроцитите от група 0 (I) се считат за контролни. Резултатът от кръстосания метод се счита за надежден, ако при взаимодействие със стандартни изохемаглутиниращи серуми и със стандартни еритроцити отговорите за изследваната кръвна група съвпадат. Ако това не се случи, и двете реакции трябва да бъдат повторени.

Декодиране на резултатите

Резултатите могат да се наблюдават няколко минути след комбинирането на реагентите. Пълното смесване на течности показва липса на реакция, а аглутинацията се проявява чрез появата на червени съсиреци в бистър разтвор. Това са червени кръвни клетки, които се слепват, когато влязат в контакт с несъвместими моноклонални антитела. След това можете да дешифрирате резултатите, като използвате прост алгоритъм:

Препоръчваме също да прочетете: Какво е кръвна група и Rh фактор (таблица)

  • Група 1 (0) - аглутинацията отсъства и в двете капки, тъй като върху еритроцитите няма аглутиногени;
  • Група 2 (А) - реакцията се наблюдава при първата капка с анти-А цоликлон;
  • Група 3 (В) - във втората капка еритроцитите се слепват при контакт с анти-В реагента;
  • Група 4 (AB) - появата на червена утайка и в двете капки.

Четвъртата кръвна група се счита за най-рядката, следователно, когато се появи аглутинация и в двете дупки, анализът се повтаря. Освен това към нормалния физиологичен разтвор трябва да се добави кръв, за да се елиминира възможността от опасни заболявания. При здрав човек той няма да реагира по никакъв начин с физиологичен разтвор и еритроцитите няма да се слепват.

За какво е анализът

Групата и Rh факторът са генетично обусловени характеристики на кръвта, които се наследяват от родителите и остават непроменени през целия живот на човека. Класификацията на кръвните групи се основава на определен набор от биохимични параметри и състава на антигените и има 4 основни групи. Преливането на пациент с кръв от несъвместима група или с друг резус фактор носи смъртна опасност - имунната система започва да произвежда антитела срещу чужди клетки, които ги атакуват и унищожават. Поради тази причина в ситуации, които носят със себе си риска от екстензивна загуба на кръв, е необходимо точно да се определи принадлежността на кръвта и Rh фактора както на донора, така и на реципиента..

Определяне на кръвна група и Rh фактор

Почти веднага след раждането от детето се взема кръвен тест за кръвна група и Rh фактор. Тези данни остават непроменени за цял живот. Родителите обаче не винаги помнят кръвната група и Rh на бебето..

Следователно те не могат да ги комуникират, когато детето порасне. Следователно много хора вземат самостоятелно кръвна група и Rh тест. Съвременната медицина предлага няколко метода за определяне на кръвната група и резус-фактора.

Ето най-популярните.

Циклони за определяне на кръвната група и резус

Можете да откриете кръвната група с помощта на tsoliclones. Този доста нов метод ви позволява да получите почти 100% надеждни резултати..

Цоликлоните са моноклонални антитела, които се синтезират чрез генно инженерство от течната тъкан на стерилни мишки. Те се използват, за да се идентифицира коя кръвна група е според системата ABO.

Този тип анализ се извършва в лабораторна среда. За да се получи надежден резултат по време на проучването, трябва да се спазват редица правила. На първо място, температурата на въздуха в помещението, където се извършват анализите, не трябва да бъде по-ниска от +15 градуса по Целзий и над +25 градуса по Целзий..

Също така лабораторията трябва да има добро осветление. За извършване на анализа се използват само висококачествени реактиви. Те не трябва да са облачни или люспести. За всеки реагент трябва да се използва отделна пипета, за да се избегне смесването.

Алгоритъмът на действие в този случай ще бъде следният. На две противоположни страни на плочата са направени надписите anti-A и anti-B, под които лаборантът поставя 0,1 ml от съответния золиклон. Можете да ги идентифицирате по сянка.

Така че, за tsoliclon anti-A той е жълто-розов, а anti-B е син. След това под реактива се поставя капка кръв. С помощта на стъклена пръчка и двете вещества се смесват.

След това се взема чиста пръчка и тази манипулация се извършва с две други вещества..

Ако няма процес на аглутинация, тогава цоликлонът става червен. След това се определя кръвната група:

  • Ако аглутинацията не преминава от двете страни на плочата, тогава в еритроцитите няма антигени А и В, следователно кръвта принадлежи към първата група.
  • Ако аглутинацията се случи само там, където е присъствал анти-А цоликлон, тогава в образуваните кръвни клетки (еритроцити) присъства само антиген А. Следователно кръвта принадлежи към втората група.
  • Ако аглутинацията настъпи само там, където е присъствал анти-В цоликлон, тогава в образуваните кръвни клетки (еритроцити) присъства само антиген В. Следователно кръвта принадлежи към третата група.
  • Ако процесът на аглутинация протича и в двата случая, тогава еритроцитите имат антигени А и В. В такава ситуация се препоръчва да се направи допълнителен анализ. За него се взема капка кръв на пациента и се смесва с изотоничен разтвор на натриев хлорид в количество от 0,1 ml. Ако в същото време не се наблюдава аглутинация, тогава се определя четвъртата кръвна група.

Този метод може също да определи Rh фактора. Алгоритъмът ще бъде същият като при определяне на кръвната група.

На бяла плоча се поставя анти-D цоликлон, а до него има капка кръв на пациента. То трябва да е 10 пъти по-малко от реагента. И двете вещества се смесват и ако е започнала аглутинация, тогава се определя положителен Rh фактор, ако не, Rh фактор е отрицателен.

Методология за определяне на кръвната група по системата ABO

Как да се определи кръвната група според системата ABO? Методът за разпознаване на кръвната група и Rh фактор по системата ABO е не по-малко популярен от предишния. Изследването се извършва и в лабораторни условия. Техниката за извършване на анализ с помощта на системата ABO е проста.

Към тях се добавят капки кръв, 10 пъти по-малки по размер. След това веществата се смесват и се наблюдава реакция. След 5 минути техникът може да започне декодирането. Оценява се аглутинацията, при която се появяват люспи и серумът става безцветен.

Методът ABO дава следните резултати:

  • няма никъде аглутинация, следователно, човек има първата кръвна група;
  • аглутинация настъпва в серума О и В, което означава, че кръвта е от група 2;
  • аглутинация възниква в серуми О и А, което означава, че кръвта е от група 3;
  • аглутинация се наблюдава във всички ABO серуми, което означава, че са необходими допълнителни изследвания, при които серумът ще бъде използван за определяне на четвъртата група. Ако в този случай процесът на аглутинация не е станал, тогава изследваната кръв принадлежи към група 4.

Как се определят кръвните групи с помощта на tsoliclones и колко надежден е той?

Човешката кръв е уникална течност. Удивителният му състав и свойства остават обект на внимателно проучване от учени и лекари. Определянето на кръвната група с tsoliclones е един от новите начини. Каква е тази техника? Възможно ли е да се определи Rh фактора чрез tsoliclones? Какво представлява този серум? Колко бързо можете да получите отговор след лабораторни изследвания?

  1. Обща информация за tsoliclones
  2. Процедура
  3. Подготвителни мерки
  4. Процедура
  5. Дешифриране на получените данни
  6. Определяне на Rh фактора чрез tsoliclones

Обща информация за tsoliclones

За да разберете как се използват tsoliclones за определяне на кръвната група, трябва да разберете какво е това и защо този метод е ефективен..

Цоликлоните са препарати, получени от кръвта на стерилни мишки. Те се използват изключително за определяне на кръвната група според системата ABO. С помощта на тези инструменти можете да определите както групата, така и Rh фактора.

Важно! Цоликлоните са разтвори на антитела срещу антигени от различен тип, които са разположени върху еритроцитните клетки. Наблюдавайки съществуващия алгоритъм, можете бързо да определите групата и Rh фактора на човек.

Процедура

За извършване на процедурата за определяне на кръвната група с tsoliclones, алгоритъмът на който е описан по-долу, се приема в лабораторни условия. Това се дължи на факта, че съхраняването на лекарства и компоненти изисква специални условия, които не могат да бъдат постигнати в ежедневието..

Процедурата се провежда при спазване на определени условия:

  • стайната температура трябва да бъде между 15-25 градуса,
  • всеки отделен реагент трябва да се съхранява в плътно затворен съд,
  • лабораторията трябва да е добре осветена,
  • ако реагентът за процедурата стане мътен, той е неизползваем,
  • ако в него има утайка, лекарството не може да се използва.

За да получите надеждна информация благодарение на този анализ, трябва внимателно да се подготвите за него..

Подготвителни мерки

Преди да започнете да определяте кръвната група, използвайки tsoliclones, трябва предварително да подготвите всички необходими инструменти, реактиви и биоматериал. Важно е да се спазват всички условия на процедурата. Това е единственият начин да разчитате на получаването на надеждна информация..

Определянето на кръвната група чрез цоликлони се извършва, ако има такова оборудване:

  • суха чиния, плоча или стъклен предмет за извършване на подобни манипулации,
  • анти-А и анти-В цоликлони,
  • две стерилни пипети за различни коликлони,
  • две стъклени пръчки,
  • стерилна спринцовка за събиране на биоматериали,
  • няколко памучни тампона,
  • стерилни кърпички,
  • алкохол,
  • сбруя,
  • физиологичен разтвор.

Сухата епруветка трябва да бъде маркирана с името на пациента, който се изследва. Формулярът, издаден от лекаря, трябва да бъде попълнен правилно от лаборанта. Той трябва да съдържа описание за групата, Rh фактор. На дъното поставят печата и подписа на лекаря.

Процедура

Алгоритъмът за определяне на кръвната група с помощта на tsoliclones е както следва.

Първо се взема кръвна проба от пациента за изследване. Това обикновено се прави с спринцовка с пет кубчета за еднократна употреба. След това се извършват такива манипулации:

  • голяма капчица цоликлони от всяка категория се нанася върху таблетката за процедурата,
  • важно е да се маркира с маркер точно в коя част на плочата кои реактиви се прилагат,
  • до него се поставя капка малък обем кръвна течност, взета за изследване,
  • Дават се 2-3 минути за проява на резултата.

За да се анализира резултатът, разбъркването на реагентите с биоматериала с различни пръчки се извършва в продължение на няколко минути. Лаборантът наблюдава отблизо реакцията на аглутинация.

Реакцията се счита за положителна, ако е имало аглутинация (адхезия). Аглутинатите са малки слепени агрегати от червен и мек характер. Ако реакцията е отрицателна, адхезията не настъпва и кръвната течност остава еднородна по структура, дори червена на цвят.

Внимание! Определянето на кръвната група чрез tsoliclones е надежден метод за установяване на вашата група и Rh фактора. Стандартният набор от процедури включва само няколко манипулации, изисква малко време и се счита за евтин метод. Процедурата винаги е една и съща. За да разпознаете точно вашата група, само квалифициран специалист трябва да извършва манипулации..

Дешифриране на получените данни

Техниката за определяне на кръвната група с помощта на цоликлони се счита за надеждна и резултатът може да бъде получен във възможно най-кратки срокове. Таблицата за пропускане на аглутинацията ви позволява да разберете как правилно да дешифрирате информацията, получена по време на процедурата.

Ако не е настъпила аглутинация с някой от реагентите, използвани по време на процедурата, за анализ се получава кръв от първата група, в която няма антигени А или В.

Ако в процеса на смесване на тестовата маса с анти-А цоликлони се получи адхезия, говорим за втората кръвна група, която съдържа антигени А.

Адхезията на анти-В цоликлони с кръвни съставки при смесване с кръвта на пациента показва, че за процедурата е дарена кръв от третата група, която съдържа В антигени.

Ако има аглутинация на кръвни фрагменти с двата вида реактиви, най-вероятно манипулацията се извършва с участието на четвъртата група. За да се потвърди това предположение, се използва специален анти-AB tsoliclon.

Определяне на Rh фактора чрез tsoliclones

За процедурата се използва само венозна кръв. Препоръката за процедурата се издава от хематолог. Очаква се лекарството да действа до минути. Комплектът с препарата включва инструкции, които дават обща представа за процедурата и процедурата за декодиране на получените данни.

За да определите Rh фактора, трябва да извършите следната процедура:

  • капка кръв се смесва с моноклонален реагент,
  • след 10-15 секунди се отбелязва слаб ефект на аглутинация,
  • пълно свързване е възможно само след минута.

Тестът за аглутинация показва дали има Rh фактор +. При положителна кръв винаги се получава аглутинация. Ако този процес не се развие, Rh е отрицателен.

И така, изследвахме определянето на кръвната група и Rh фактора чрез tsoliclones (процедурен алгоритъм). Прилагането на този метод е широко разпространено в лечебните заведения в различни страни. Ако манипулацията се извършва в лабораторни условия при спазване на всички правила, можете да получите надеждна информация за кръвната група и Rh фактора.

Определяне на кръвна група с tsoliclones

Метод за анализ

Алгоритъмът за определяне на кръвната група AB0 и Rh фактор чрез tsoliclones улеснява и стандартизира процедурата за типизиране. Позволява еднозначно да интерпретира резултата от реакцията антиген / антитяло. Една партида реактиви е достатъчна за всеки анализ на AB0. Обект на изследване е пълна кръв, еритроцитна маса, измити еритроцити, кръвни клетки в серум или физиологичен разтвор.

Като пример даваме схема за типизиране на човешка кръв според антигенната система AB0.

  1. Осигурете ярко осветление в стаята и температура на въздуха от 15 - 25 ° C.
  2. Кладенчета с етикетни плочи: Anti-A, Anti-B, Anti-AB.
  3. Добавете една капка (приблизително 0,1 ml) реагенти Anti-A, Anti-B, Anti-AB към етикетираните ямки.
  4. Поставете една малка капка концентрирана среда, съдържаща еритроцити (0,01 - 0,03 ml) до голяма капка от всеки реагент.
  5. Смесете моноклонален реагент с кръв във всяка от трите ямки с отделна стерилна стъклена пръчка.
  6. Разклатете таблетката внимателно в продължение на 2,5 - 3 минути. Обикновено аглутинацията се формира в рамките на 5 до 10 секунди. Необходимо е време за откриване на слаби антигенни варианти.
  7. Извършете визуална оценка на резултатите от реакцията във всяка ямка. Резултатът от реакцията показва откриването на съответния аглутиноген.

Резултати от реакцията

Таблица с резултатите от определянето на кръвна група с помощта на tsoliclones.

Групова принадлежностМоноклонален реактив
Анти-ААнти-БАнти-АВ
0 (I)---
A (II)+-+
Б (III)-++
AB (IV)+++

"+" - положителен резултат от реакцията;
"-" - няма аглутинация.

  • Отрицателният резултат от реакцията и в трите ямки показва липса на аглутиногени. Група: 0 (I).
  • Аглутинацията с Anti-A и Anti-AB показва наличието на аглутиноген А. Принадлежност към групата: A (II).
  • Реакцията в кладенците Anti-B и Anti-AB показва наличието на антиген В. Група: B (III).
  • Реакцията и в трите ямки показва наличието на двата антигена. Група: AB (IV).

Методологията на изследването с използване на цоликлони изисква задължително потвърждаване на резултатите от реакцията чрез идентифициране на аглутинини α и β от стандартни еритроцити.

Алгоритъмът за определяне на Rh фактор чрез tsoliclones е представен в съответната статия.

Определяне на кръвна група и Rh фактор

Определянето на кръвната група и Rh фактора се разделя на два начина:

  1. първично определяне на кръвна група и Rh фактор (анти-А, Анти-В и Анти-D коликлони)
  2. вторична диагноза на кръвна група и Rh фактор (стандартни серуми и кръстосан метод, определяне на фенотипа, т.е. антигени C, c, E, e, C w, K, k)

Експресната диагностика (първично определяне на кръвна група и Rh фактор) не взема предвид антигените на Kell, да не говорим за други системи за проверка. Следователно, tsoliclones се използват само за първично определяне на кръвната група и Rh фактор и в случай на спешни индикации за преливане на кръвни съставки.

Повече информация за най-редката кръвна група в света можете да намерите тук.

Определяне на кръвна група и Rh фактор чрез анти-А, анти-В и Анти-D цоликлони съгласно системата AB0 и Rh системата

Определянето на кръвната група и Rh фактора чрез анти-А, анти-В и Анти-D супер цоликлони е най-модерният и относително прост метод. За определяне на кръвната група се използват цоликлони, т.е. моноклонални антитела.

Какво е необходимо за определяне на кръвната група и Rh фактора?

- tsoliclon анти-А;

- tsoliclon анти-В;

- tsoliclon anti-D;

- разтвор на натриев хлорид 0,9%; специална таблетка; стерилни пръчки.

Алгоритъм и процедура за определяне на кръвната група

Нанесете цоликлони анти-А, анти-В върху специална таблетка, една голяма капка (0,1 ml), под подходящите етикети.

До тях капнете тестваната кръв (0,01–0,03 ml), по една малка капка в даден момент. Разбъркайте ги и наблюдавайте началото или отсъствието на реакция на аглутинация в продължение на 3 минути. Ако резултатът е съмнителен, добавете 1 капка 0,9% физиологичен разтвор.

Дешифриране на резултатите от определяне на кръвната група

  • ако реакцията на аглутинация е настъпила с анти-А цоликлон, тогава изследваната кръв принадлежи към група А (II);
  • ако реакцията на аглутинация е настъпила с анти-В цесолон, тогава изследваната кръв принадлежи към група В (III);
  • ако реакцията на аглутинация не е настъпила при анти-А и анти-В соликлони, тогава изследваната кръв принадлежи към група 0 (I);
  • ако реакцията на аглутинация е възникнала с анти-А и анти-В соликлони, тогава изследваната кръв принадлежи към групата AB (IV), както е показано на фигурата.
Определяне на Rh фактора чрез золиклон Anti-D

На плочата се смесват голяма капка (0,1 ml) анти-D золиклон и малка капка (0,01 ml) от кръвта на пациента, която трябва да се изследва. Началото на реакцията на аглутинация или нейното отсъствие се наблюдава в продължение на 3 минути.

  • ако реакцията на аглутинация е настъпила с анти-D цоликлон, тогава изследваната кръв е Rh-положителна (Rh +)
  • ако реакцията на аглутинация не е настъпила при анти-D цоликлон, тогава тестваната кръв е Rh-отрицателна (Rh -)

С други думи, когато се смесва цоликлон Anti-D с Rh-положителни еритроцити, възниква реакция на аглутинация и ако кръвта е Rh-отрицателна, няма аглутинация (както е показано на фигурата - четвъртата кръвна група е Rh-отрицателна).

Определяне на кръвни групи със стандартни серуми

Определяне на кръвни групи чрез стандартни изохемаглутиниращи серуми - търсене и откриване на антигени А и В в кръвта с помощта на реакцията на аглутинация. За да постигнете целта, използвайте:

  • Стандартни изохемаглутиниращи серуми на кръвни групи O (I) - безцветни, A (II) - сини, B (III) - червени, AB (IV) - жълти.
  • Бели плаки, маркирани с кръвни групи: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стъклени пръчки

Метод за определяне на кръвната група със стандартни серуми

Метод за определяне на кръвната група със стандартни серуми

  1. Подпишете плочата (име на пациента);
  2. Нанесете обозначения на две серии стандартни серуми от I, II и III кръвни групи в обем от 0,1 ml, образувайки два реда от по три капки отляво надясно: 0 (I), A (II), B (III);
  3. Вземете кръв от вена. Прехвърлете шест капки кръв на пациента, за да бъдете изследвани със стъклена пръчка, върху плоча в шест точки до капка стандартен серум и разбъркайте.

Аглутинацията ще започне след 30 секунди. В онези капки, при които е настъпила аглутинация, добавете една капка NaCl 0,9% и оценете резултата.

Оценка на резултатите Определяне на кръвна група със стандартни серуми

Положителната реакция на аглутинация може да бъде пясъчна или листенца. В случай на отрицателна реакция капката остава равномерно оцветена в червено. Резултатите от реакциите на капки със серуми от същата група (две серии) трябва да съвпадат. Принадлежността на изследваната кръв към съответната група се определя от наличието или липсата на аглутинация при реакция със съответните серуми след наблюдение в продължение на 5 минути. Трябва да се отбележи, че ако серумите и на трите групи са дали положителна реакция, това показва, че изследваната кръв съдържа както аглутиногени (А и В) и принадлежи към група АВ (IV). В такива случаи обаче, за да се изключи неспецифична реакция на аглутинация, е необходимо да се извърши допълнително контролно проучване на изследваната кръв със стандартен изохемаглутиниращ серум от група АВ (IV), който не съдържа аглутинини. Само липсата на аглутинация при тази капка в присъствието на аглутинация в капки, съдържащи стандартни серуми от групи 0 (I), A (II) и B (III), ни позволява да разгледаме реакцията като специфична и да отнесем изследваната кръв към група AB (IV).

Определяне на кръстосана кръвна група

Определяне на кръстосана кръвна група - откриване на наличие или отсъствие на антигени А и В в тестваната кръв с помощта на стандартни изохемаглутиниращи серуми, както и антитела α и β, използвайки стандартни еритроцити. Реакцията със стандартни серуми се провежда, както е описано по-горе..

Метод за кръстосано групиране

Реакция със стандартни еритроцити

За да реагират със стандартни еритроцити, са необходими стандартни еритроцити от три кръвни групи: 0 (I), A (II), B (III).

Метод на реакция със стандартни еритроцити

  1. Кръв за изследване се взема от вена в епруветка, центрофугира се или се оставя за 30 минути, за да се получи серум.
  2. Три големи капки (0,1 ml) кръвен серум от епруветка се нанасят върху маркирана плочка, а до тях една малка капка (0,01 ml) стандартни еритроцити от групи.
  3. Съответните капки се смесват със стъклени пръчки, плочата се разклаща, наблюдава се в продължение на 5 минути, NaCl 0,9% се добавя към капките с аглутинация и резултатът се оценява.

Оценка на резултатите от реакцията със стандартни еритроцити

Оценете резултатите, получени със стандартни изохемаглутиниращи серуми и стандартни еритроцити. Особеността на резултатите от реакцията със стандартни еритроцити - еритроцитите от група 0 (I) се считат за контролни. Резултатът от кръстосания метод се счита за надежден, ако при взаимодействие със стандартни изохемаглутиниращи серуми и със стандартни еритроцити отговорите за изследваната кръвна група съвпадат. Ако това не се случи, и двете реакции трябва да бъдат повторени.

Алгоритъм за определяне на кръвната група (Rh фактор) от tsoliclones и как да го направите с помощта на таблицата

Определянето на кръвната група с цоликлони се прави за бременни жени преди раждането, за болни хора - преди операция и когато може да се наложи кръвопреливане. Има и други методи с използване на различни вещества, но този метод е най-точен и се използва най-често..

Какво е tsoliclon

Циклоните за определяне на кръвната група са антитела, получени по специална технология. За получаване на tsoliclones се използват лабораторни експериментални плъхове. Гризачите се инжектират със специален агент и след това се взема кръв от перитонеума, включва вещества, необходими за анализ.

Цоликлоните в техния състав принадлежат към имуноглобулини, те реагират с антигени, разположени върху мембраната на еритроцитите. Видовете тези вещества се използват за идентифициране на групата. По време на анализа золиклоните от различни видове реагират с аглутиногени, това прави възможно идентифицирането на групата и човешкия Rh фактор.

Лекарството се произвежда в течна форма в бутилки от 5 и 10 ml. Всеки вид лекарства има свои собствени характеристики.

Цоциклоните имат предимство пред другите серуми, тъй като не изискват дълга подготовка за прегледа и правят възможно бързото му извършване. Те не представляват човешки клетки и следователно при контакт с тях лекарите не могат да се заразят с никаква инфекция..

Подготовка за процедурата

В офиса не трябва да има прах, мухи, насекоми, които могат да попречат на теста. Стаята трябва да е добре осветена. Флаконът с цоликлони трябва да бъде плътно затворен, така че реагентите да не изсъхнат, в противен случай надеждността на анализа ще намалее. За да се определи кръвната група и резус с помощта на цоликлони, е необходимо специално обучение. В лабораторната стая температурата на въздуха може да бъде + 15... + 25ºC, в този случай резултатът ще бъде точен.

Преди анализа се подготвят необходимите медицински инструменти:

  • епруветка;
  • плочата, върху която е нанесен реагентът;
  • пипети;
  • пръчки за събиране на лабораторни проби.

Ако медицински специалист не само извършва изследвания, но и взема анализ от пациент, тогава е необходимо да се подготви:

  • сбруя;
  • алкохол за медицинско лечение;
  • спринцовка за еднократна употреба;
  • епруветки;
  • памучен тампон;
  • салфетки;
  • специален лабораторен маркер.

Как се прави изследването

Алгоритъмът за определяне на кръвната група по tsoliclones е както следва. Лабораторното изследване се извършва с помощта на 3 вида от тези вещества:

  • "Анти-А" е червено, бутилката, капачката и етикетът на лекарството имат еднакъв нюанс.
  • „Anti-B“ е синьо, а капачката, бутилката и етикетът са оцветени в синьо.
  • "Anti-D" - безцветна и в прозрачна бутилка.

При определяне на Rh фактора с tsoliclones не могат да се използват нискокачествени реагенти. Ако бутилката е дефектна или има утайка вътре в течността, реагентът ще загуби ефекта си. За да определи групата, медицински специалист прилага цоликлони върху лабораторна плоча, направена под формата на таблица. Прилагат се различни видове реактиви (A, B и D). Всяка проба е подписана. Tsoliklon се нанася върху маркираната област. Всеки тип реактив се взема със собствена пипета.

До серума се капе 1 капка човешка кръв, след което се разбърква с чиста пръчка с реагенти. След няколко секунди ще започне реакция. Лаборантът наблюдава реагентите в продължение на 3 минути. След това можете да дешифрирате резултата от анализа.

Декодиране на резултатите

Определянето на кръвна група с помощта на цоликлони се извършва при декодиране на резултатите от теста. Ако в пробата няма реакция на залепване, тогава в анализа няма аглутиноген от този тип. В този случай анализът принадлежи към група 1. Ако клетките реагират с анти-А и анти-D реагенти, това означава, че човек има тип 2 (А).

Взаимодействието на еритроцитите с анти-В и Анти-D тип цоликлони показва, че човек има група 3 (тип В). Ако малките тела са взаимодействали с всички видове tsoliclones, тогава пациентът има кръвна група 4 (тип D). При откриване на кръвна група с помощта на тези реагенти не е необходимо да се извършват допълнителни проверки, тъй като цоликлоните нямат никакви добавки, причиняващи грешна реакция. Кръвната група се определя в медицинско заведение, анализът се извършва в специална лаборатория.

Таблица за декодиране на резултатите от изследването:

Този тест ви позволява да откриете жизненоважни данни за групата на пациента и Rh фактор. Резултатите позволяват да се осигури медицинска помощ и кръвопреливане на пациента след операция. За да разберете вашата група, можете да проведете анализ в лабораторията на всяко лечебно заведение. Информацията се въвежда във въпросника на пациента и получените данни се съхраняват в клиниката в продължение на няколко години.

Алгоритъм за определяне на кръвната група по tsoliclones

В продължение на векове учените се опитват да научат възможно най-много за човешкото тяло и да се научат как да лекуват болните от всяка болест. Един от важните параметри е определянето на кръвната група чрез цоликлони. Медицината идентифицира само четири кръвни групи при хората, независимо от пола или расата. Имунологичните признаци, които съставляват основната разлика в групата на еритроцитните антигени, се наследяват.

  1. Какво е tsoliclon
  2. Подготовка за процедурата
  3. Анализ
  4. Как да разберем резултата

Какво е tsoliclon

Определянето на кръвната група с помощта на различни лабораторни реактиви е стандартен метод за изследване. Информацията за кръвната група е изключително важна, особено в случаите, когато човек се нуждае от спешна помощ. Преди операцията задължително се определя вида на индивидуалните антигенни характеристики на човек. Същата процедура е задължителна за военнослужещите (информацията е посочена във формуляра), за жените преди раждането и т.н..

Определянето на кръвните групи чрез tsoliclones е сравнително нов метод за изследване. Този анализ може да се извърши на всеки етап от стационарното лечение..

Извършването на лабораторни изследвания не отнема много време, всички необходими химикали (tsoliclones) и просто оборудване са достатъчни.

Циклоните по същество са вид имуноглобулин (тип М). Това са моноклонални антитела, които са произведени чрез генно инженерство. Коликлоните са получени в резултат на излагане на серум на стерилни лабораторни мишки. В коремната кухина на гризача се образува натрупване на течност, която съдържа тези антитела.

Подготовка за процедурата

Определянето на кръвни групи с помощта на цоликлони изисква предварителна подготовка и действия съгласно установения алгоритъм. Ситуацията в помещението, в което се извършва анализът, се договаря отделно. Температурата на въздуха трябва да бъде най-малко 15 и не по-висока от 25 градуса, в противен случай резултатът от изследването не може да се счита за надежден. В стаята не трябва да има прах, животни, насекоми и други фактори, които могат да повлияят физически на процеса на изследване. Също така лабораторният анализ изисква добро осветление на помещението..

Когато използвате tsoliclones, е важно флаконите да се държат плътно затворени и да не се оставя реагентите да изсъхнат, в противен случай способността на антителата за активно действие е значително намалена. Цялото необходимо оборудване е подготвено преди процедурата. Анализът изисква биологична епруветка за проби, реагентна плочка, стерилни пипети и пръчки за взаимодействие с биологични проби..

Ако лаборант провежда не само лабораторни изследвания, но и вземане на кръвни проби, тогава е необходимо да се подготвят спринцовки за еднократна употреба или вакуумни епруветки, турникет, медицински алкохол, памучни топки и стерилни кърпички. Също така, под ръка трябва да има инструменти за етикетиране на биоизображенията на пациентите..

Анализ

В съвременната лабораторна диагностика се използват три вида стандартни цоликлони за определяне на кръвната група и Rh фактора. Анти-А реагентът е оцветен в червено, а бутилката, капачката или етикетът на бутилката също са оцветени. " Типът "Anti-B" е оцветен в синьо, а "Anti AB" не е маркиран с цветен маркер. Производителите на реактиви произвеждат опаковки с 5 или 10 ml цоликлони. Не се разрешава използването на развалени или нискокачествени реагенти.

При наличие на видими дефекти на опаковката или поява на люспи в течността, золиклонът не се използва..

  • За определяне на кръвната група се прилагат различни видове tsoliclones (A, B и AB) върху специално подготвена плоча, която е оформена като маса. Всеки от тях трябва да бъде подписан. Реактивът се нанася върху специално маркирана зона. Всеки вид золиклон трябва да се прилага с отделна стерилна пипета.
  • Поставете 1 капка кръв на пациента до реактивите.
  • Със стерилна пръчка реагентите се смесват с биологичната проба.
  • Вече след няколко секунди можете да забележите промените и продължаващата реакция на аглутинация. Според правилата наблюдението трябва да се извърши в рамките на 3 минути. След това можем да заключим за резултатите от изследването.

Как да разберем резултата

  • Липсата на каквато и да е адхезионна реакция във всички проби означава, че в еритроцитните клетки на пациента няма аглутиноген от изследвания тип. Кръвна проба се причислява към група I (тип 0).
  • Ако еритроцитните клетки на пациента реагират с анти-а и анти-АВ реактиви, тогава пациентът има кръвна група II (тип А).
  • Забележима аглутинация на кръвната проба с анти-АВ и Анти-В соликлони означава, че пациентът има III кръвна група (тип В).
  • Ако кръвта на пациента е реагирала с всички химически реактиви, тогава пробата за изпитване принадлежи към група IV (тип АВ). При определяне на кръвната група с помощта на цоликлони не се изисква допълнителна проверка, тъй като реагентите не съдържат добавки, които могат да предизвикат спонтанна реакция.

Определянето на кръвната група и Rh фактора се извършва в лабораторни съоръжения в лечебни заведения. Това е доста просто проучване, което предоставя много полезна и жизненоважна информация за човек..

В бъдеще информацията за кръвната група и Rh фактора ще позволи бърза помощ и кръвопреливане след нараняване или злополука и може да бъде животоспасяваща. Можете да откриете своя GC номер сами, като поръчате изследване във всяка медицинска лаборатория. Получените данни трябва да бъдат въведени в записа на пациента.